生姜凝固豆乳蛋白酶提取纯化的研究-论文.pdf

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1、●工艺技术j；，工案生姜凝固豆乳蛋白酶提取纯化的研究刘瑶’，孙楚，周媛媛’，董兴叶’，吴非’1．东北农业大学食品学院(哈尔滨150030)；2．东北农业大学经管学院(哈尔滨150030)摘要以新鲜生姜为原料，以生姜蛋白酶凝豆乳活力为指标，采用硫酸铵分级沉淀与葡聚糖凝胶G一75层析相结合的方法，提取生姜凝固豆乳蛋白酶，确定了硫酸铵分级沉淀的最优饱和度为20％～60％，葡聚糖凝胶G-75层析最佳的柱床高度为50cm，进样量为3mL，洗脱速度为1．5mL／min。按照该工艺提取生姜凝固豆乳蛋白酶比酶活力为129．53，纯化倍数为姜汁的2．46倍。

2、关键词生姜；凝固豆乳蛋白酶；提取；纯化StudyonSeparationandPurificationofGingerCoagulatedSoy．milkProteaseLiuYao。SunChu，ZhouYuan-yuan。，DongXing-ye’，WuFei’，1．CollegeofFood，NortheastAgriculturalUniversity(Harbin150030)；2．CollegeofEconomicsandManagement，NortheastAgriculturalUniversity(Harbin15003

3、0)AbstractGingerwasusedasmaterialtoseparatethegingerprotease．GingerproteasewasproducedbyammoniumsulfateprecipitationandSephadexG一75，theoptimizedseparationandpurificationprocessincludedfolowingsteps：20O／o-60o／osaturationammoniumsulfateprecipitations，gelfiltrationchromatogra

4、phywithSephadexG-75．Theparameterswereasfollowing：gelbedlength50cm，sampleapplicationamount3mL，flowrate1．5mL／min．Thecoagulationactivityincreasedto2．46foldsofgingerjuice，thespecificactivityWas129．53．Keywordsginger；coagulatedsoy-milkprotease；separation；purification生姜属姜科姜属植物，为药

5、食兼用香辛材料]，DEAE一纤维素、双水相萃取纯化等。单宁法提取的生在我国种植面积较广且种植历史较为悠久，所以生姜姜蛋白酶活力受单宁浓度的影响较大，这种技术还不的来源广泛且价格低廉。近些年来，研究者越来越关成熟；双水相萃取技术的应用还不广泛，在工业上应注生姜的深度开发，发现生姜中含有的生姜蛋白酶是用还有一定的困难；葡聚糖凝胶原理是根据被分离样半胱氨酸蛋白酶，它因在结构和性质上与木瓜蛋白酶品中各组分分子量大小的差异对样品进行分离，属于相似，所以将其归属木瓜蛋白酶家族体系】。开发生物理分离，与其它纯化方法比较对生姜蛋白酶的活性姜蛋白酶，不但可以

6、缓解木瓜、菠萝等热带水果的依影响较小。本研究采用硫酸铵分级沉淀与葡聚糖凝胶赖p]，还对生姜的开发利用及稳定生姜的种植面积是G一75层析相结合的方法对生姜凝豆乳蛋白酶的提取纯至关重要的。目前，已证明生姜蛋白酶有凝固豆乳和化进行研究。牛乳的作用]，张平平、于新等人也证明了其中的凝1材料与方法乳因子就是生姜蛋白酶。开发生姜蛋白酶作为凝固剂生产豆腐，丰富豆腐的品种，可以改变豆腐的口感；1．1材料与仪器生姜蛋白酶还可以应用到大豆干酪的加工中，对消除生姜：市售；大豆：东北农业大学大豆研究所提大豆干酪的豆腥味有作用。由于生姜蛋白酶的水解作供；葡聚糖凝胶G

7、一75：上海君创科技有限公司；透析用，在作用于豆乳时产生的大豆多肽更利于人体吸袋：截留分子量为8000～14000，上海聚源科技有限收，具有降血压和胆固醇的效果l5】，这将对开发保健公司；考马斯亮蓝G一250：分析纯，哈尔滨市化学试型大豆食品奠定基础。剂公司；磷酸氢二钾、磷酸二氢钾：均为分析纯，天生姜蛋白酶的提取方法以有机溶剂沉淀和盐析沉津市津东天正精细化学试剂厂；硫酸铵：天津博迪化淀法为主【7】，目前使用丙酮制作丙酮粉的方法应用的工股份有限公司；牛血清蛋白：北京普博斯生物科技较多，且具有提纯度高的优点，制备过程操作繁琐且有限公司。消耗大量

8、丙酮，此方法效率低、成本高；硫酸铵分级JJ一2B组织捣碎机：江苏省金坛市友联仪器研究沉淀的方法对酶活性的破坏程度小，且通过硫酸铵分所；LGJ一50C真空冷冻干燥机：哈尔滨天林科技