脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究-论文.pdf

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1、中国医药导报2014年2月第11卷第4期论著·脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究袁志坚t何文涓周红蒋美玲1．无锡卫生高等职业技术学校．江苏无锡214028；2．中国药科大学，江苏南京210009【摘要】目的分离提取脂肪干细胞(ADSCs)，对其进行成脂、成骨的鉴定，并与脂肪颗粒混合移植，观察移植后的脂肪组织的存活情况。方法取大鼠腹股沟脂肪，磷酸盐缓冲液清洗，0．1％I型胶原酶37℃消化1h，离心，取沉淀，用含10％血清的DMEM培养基进行培养、传代，取第3代ADSCs用于成脂、成骨鉴定；另取第3代ADSCs用于移植，分为两组

2、：ADSCs(密度为5x107／mL)0．9mL+脂肪颗粒0．6mL组、脂肪颗粒1．5mL组，分别移植于大鼠背部两侧，共移植24只大鼠，分别于2周、1、3个月时脱颈椎处死8只大鼠，再取出背部脂肪组织。结果大鼠AD—SCs成脂、成骨诱导后，经油红O、茜素红染色呈阳性，移植2周、1个月时，两组取出的脂肪组织的体积变化不大；但移植3个月后，取背部脂肪组织，称重：脂肪颗粒1．5mL组平均重量为(0．4551~0．0024)g，而ADSCs(密度为5xl0~mL)0．9mL+脂肪颗粒0．6mL组的平均重量为(0．7798~0．0033)g，两组脂肪组织

3、的重量差异有统计学意义(P<0．05)。结论原代分离、培养的ADSCs生长状况良好，具有向成脂、成骨分化的能力，与脂肪颗粒混合移植后组织的存活率高，并能够改善脂肪颗粒单独移植时的液化吸收情况。【关键词】脂肪干细胞；成脂诱导；成骨诱导；移植[中图分类号】R329【文献标识码】A[文章编号】1673—7210(2014)02(a)一0009—05Isolation，cultureandtransplantati0nofratadip0se—deriVedstemcellsYUANZhijianlHEWenjuaniZHOUHOngJIANGMei

4、linf1．WuxiHigherHealthVocationalSchool，JiangsuProvince，Wuxi214028，China；2．ChinaPharmaceuticalUniversity，JiangsuProvince，Naming210009，China[Abstract】0bjectiveToisolateandculturetheratadip0se—derivedstemcells(ADSCs)andtoidentificateitsmultipo—tentdifferentiationabilityandtoob

5、servethesurvivaloftransplantationofADSCswithadiposecomparedwithadiposeinthebackoftherats．MethodsAdiposetissuewereobtainedfrominguinalregionandwashedinPBS，thendigestedwith0．1％collagenasetypeIat37~Cfor1hfollowedbycentrifugationandADSCspelletwasresuspendedinDMEMwith10％fetalbov

6、ineserum(FBS)andseededinflasks，ceilsatpassages3wereusedforadipogenicdifferentiationandosteogenicdifferentiation，bothsidesoftwenty-fourratswerereceivedsubcutaneously5x107／mLADSCsresuspend—edin0．9mLofDMEMmedium+0．6mLofadiposeand1．5mLofadipose．tookouttheadiposetissueofeightrat

7、saf-tertwoweeks，onemonthandthreemonthsrespectively．ResultsADSCsstainedpositivelyforoilred-Oandalizarinred，twoweeksandonemonthlater，theweightofadiposehadnodifferencewitheachother，however，afterthreemonths，theaverageweightof1．5mLofadiposegroupandthe5xl07／mLADSCsresuspendedin0．

8、9mLofDMEMmedium+O．6mLofadiposegroupwere(0．4551_+0．0024)gand(0．7798~0．0033)grespect