酶催化大豆油脱胶最佳工艺条件的研究-论文.pdf

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1、技术Technique·油脂工程酶催化大豆油脱胶最佳工艺条件的研究潘丽林敏刚谷克仁常振刚2(1．河南工业大学2．河南中经进出FI有限责任公司)【摘要】以磷脂酶A，为催化剂，探讨了酶催化大豆油脱胶的最佳工艺条件。通过单因素及正交试验，得到最佳工艺条件为：反应温度48℃、反应时间180min、pH值4．8、加酶量30mg／kg、加水量2．0％和搅拌速度120r／rain．可使大豆油合磷量降到5．4mg／kg。【关键词】磷脂酶A；大豆油；脱胶中图分类号：TS724．6文献标识码：A文章编号：1000—9868(2012)08—0064—03植物油胶溶性杂质的存在不仅影响油脂的稳定性，油样在8

2、0℃的水浴中保持t0min．然后离心分离t0min而且影响油脂精炼和深加工的工艺效果。因此．人们不(4000r／min)，取5g上层油样进行磷含量分析。磷含量断追求新的脱胶方法将植物油胶溶性杂质脱除到最低。分析参照GB5537—1985钼蓝比色法。化学脱胶法有一定的脱胶效果，但脱胶油中非水化磷脂1．3．2油相中pH值的测定的残留量仍然较高，很难满足物理精炼工艺的要求。酶取5mL油水乳化液与5mL去离子水混合。置于离心法脱胶是利用酶催化水解植物油中的非水化磷脂．生成机中于4800dmin离心20rain后，吸出上层油相，将水溶于水的溶血磷脂，再通过水化的方法除去。与化学脱相保留，用电子p

3、H计测定水相pH值，经校正后采用。胶法相比，酶法脱胶出油率高，适应性广，反应条件温校正公式为：pH值校正=pH值定一0．38。和，油脚含油量低，且不产生废水，具有推广应用价值。1．3．3磷脂酶A酶活力测定方法现用于脱胶的磷脂酶主要是Novo公司推出的酶活力测定参照文献[4]。Lecitase10L，LecitaseNovo和磷脂酶A1(LecitaseUltra)，1．3．4酶法脱胶的步骤其中磷脂酶A(LecitaseUltra)热稳定性好、酶活性高，准确称取100g水化脱胶油于250mL碘量瓶中，在应用于植物油脱胶效果好且稳定。本研究采用磷脂酶A80℃的水浴中预热10min．加入适量

4、5O％的柠檬酸。放对大豆毛油进行脱胶，探讨最佳工艺条件，以降低混合入水浴恒温振荡器中，振荡40min。然后冷却到45℃后油含磷量，保证磷脂的色泽与品质，为工业化生产提供加入一定量柠檬酸钠溶液，调节pH值，再加入一定量理论依据和技术支持。的蒸馏水混合均匀后，和经稀释10倍的磷脂酶A，在机械搅拌条件下反应一定时间后．8O℃水浴保持10min1试验材料与方法灭酶活，终止反应。然后离心(3500r／min，10rain)，上1．1主要原料与试剂层为脱胶油，下层为溶血磷脂。对脱胶油磷含量进行分大豆毛油(初始含磷量为105．6mg／kg)，河南阳光油析。脂有限公司；磷脂酶A。，Novozyme公司

5、；盐酸，氢氧化2结果与讨论钠，柠檬酸。柠檬酸钠均为分析纯。1．2主要仪器2．1磷标准曲线的绘制恒温摇床SHA—C、万用电炉、微量移液管、马弗磷标准曲线如图1所示，y=2．3829x+O．0103R。=炉、7225分光光度计和恒温水浴锅等。1．0000，其线形关系良好，可作为标准曲线。1．3试验方法2。2单因素试验1．3．1磷含量的测定2．2．1反应时间对脱胶的影响取油样约10mL，为了便于胶质与油的分离，先将在反应温度48％，调节pH值4．8，加酶量30mg／kg，64诺豳·2012．08油脂工程·Technique技术^、咖如龉系数。从而有利于反应的进行，使得磷含量降低。当温^一．度

6、超过48℃，温度过高引起了酶热变性，使得磷含量迅速上升。故取反应温度48℃为宜。2-2．3pH值对脱胶的影响在反应温度48℃，反应时间3h，加酶量30mg／kg，搅拌速度120r／min，加水量2．0％条件下，考察了pH值含磷量ling对脱胶效果的影响，结果如图4所示。图1磷含量标准曲线搅拌速度120r／rain，加水量2．0％条件下，考察了反应时间对脱胶效果的影响。结果如图2所示。4．24．44由4．，．U．Z，．4pH值图4pH值对脱胶的影响由图4可知：pH值对脱胶效果影响较大。随着pHUlZUlUlU210240270时间／rain值的增大，油样中磷含量呈先降后增的趋势。在pH值

7、图2反应时间对脱胶的影响为4．8时，酶活力最强，磷含量降到最低。此时随着pH一．)，咖如鼙由图2可知：在一定温度下．反应初始阶段大部分值的升高，酶活力逐渐减弱。脱胶效果逐渐变差。非水化磷脂较快地转化为水化磷脂，但随着反应时间的2．2．4加水量对脱胶的影响推移。非水脂磷脂的转化速度逐渐减慢。表明酶的催化在反应温度48℃，调节pH值4．8，反应时间3h，加活力与反应时间有着密切的关系．反应时间太短，酶未酶量30mg／kg，搅拌速度120r／rain