粮食游离氨基酸含量测定方法精密度及回收率分析-论文.pdf

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1、第39卷第3期粮食钟技锯；i}VOI．39．No．32014年6月GrainScienceandlTechno

2、0譬Yand'EconomYJun2014粮食游离氨基酸含量测定方法精密度及回收率分析姜平，郑亿青，一，李兴军(1．国家粮食局科学研究院，北京100037；2．河南工业大学粮油食品学院，河南郑州450001)[摘要]根据粮食中游离氨基酸的氨基与水合茚三酮反应生成蓝紫色化合物，采用比色法测定粮食中游离氨基酸含量。采用二因素随机区组试验设计和生物统计软件SSPS11．5的单因素方差分析表明，本方法测定的粮食种类间游离氨基酸含量次

3、序为大豆>小麦=玉米>糙米>大米，其中大米游离氨基酸含量最低。该方法非常灵敏，加入标准亮氨酸2mg的回收率对谷物大于58．8％，对大豆大于20．2％，精密度小于20％。[关键词]游离氨基酸；水合茚三酮；二因素随机区组试验设计；粮食；蛋白质；裂纹蛋白质含量(干基)是评价我国优质强筋小麦和1．2．1样品含水率弱筋小麦重要的品质指标n，如粗蛋白含量对一级样品含水率按照GB／T5497—85进行测定。强筋小麦为15．0％，对二级强筋小麦为14．O％，对弱1．2．2样品制备筋小麦为11．5％。小麦萌动48h后游离氨基酸含量谷物(糙米、大米、小麦

4、、玉米)、大豆粉碎后，称显著增加0．22～0．46倍，而且在小麦原粮及谷朊粉、取1．0g粉于50mL塑料离心管中，加入15mL己饺子粉及自发粉中均检测到游离氨基酸[4]。由于我烷，充分涡旋，盖上盖子。在震荡摇床上常温下震荡国收购的谷物、大豆种类类型及品种多而复杂，干燥3ho对含油量高的大豆样品可以过夜脱脂。在4cI=低或人仓过程易产生裂纹、破碎粒及不完善粒，储藏过温冷冻离心机6000r／min离心10min，吸走己烷层，程随季节变化存在水分迁移现象(如冬夏季节分别取沉淀并在通风橱挥发己烷。然后转到研钵中，加入在小麦仓芯顶部和底部水分升

5、高了2％)，而且储存5mL无氨蒸馏水在室温下充分研磨，并用5mL无时间较发达国家时间长，所以有必要分析蛋白酶降解氨蒸馏水洗涤转入离心管，在4℃离心机6000r／min谷物和油料种子贮藏蛋白产生的游离氨基酸含量，离心10min，上清液即为游离氨基酸提取液。离心以反映原粮及制品中贮藏蛋白的变化。本文分析了后，含油量高的大豆样品上清液含有悬浮物，可对上粮食游离氨基酸含量比色测定法的精密度及回收率。清液以定量滤纸进行过滤。1．2．3粮食游离氨基酸测定l材料与方法测定方法按照文献5l。吸取0．5mL样品提取液1．1仪器设备、试剂于10mL带塞刻

6、度试管中，依次加入无氨蒸馏水电子天平：精密度0．001g、0．00001g；JFSD一1000．5mL、4．38M醋酸缓冲液(pH5．3)0．5mL、3％茚三一Ⅱ型粉碎机；WH一866型混合仪；JLGJ4．5型检验砻酮0．5mL、0．1％抗坏血酸0．05mL，混匀，盖上盖子。谷机；101—1A型电热鼓风干燥箱；SG3—30k型冷冻置85℃水浴中12min，冷却后于每管中加入95％乙离心机；紫外可见分光光度计；震荡摇床；超声波清醇5mL，塞好塞子，剧烈涡旋试管，然后定容至10洗器；研钵(直径8am)；10mL具螺旋盖的刻度玻璃mL后测其

7、吸光值。试管若干；移液枪200、1mL、5mL；试管架；定量1．3试验设计与数据处理滤纸；电热恒温水浴锅。整个试验按照二因素随机区组设计，二因素分己烷、95％乙醇、无氨蒸馏水、冰乙酸；水合茚三别是测试者、粮食品种。数据分析采用生物统计软件酮；氢氧化钠、无水乙酸钠、NaBH；亮氨酸，均采用SSPS11．5的单因素方差分析比较平均值。分析纯。2结果与分析1．2试验方法收稿日期：2014—04—282．1方法重现性作者简介：姜平，女，硕士，研究方向为粮食碳水化合物营养。7位分析者独立对糙米、大米、小麦、玉米、大豆通信作者：李兴军，男，博士，

8、副研究员，研究方向为粮食生理生化与分子营养。每个样品平行测定3次，5个品种共计105个数据。32姜平等：粮食游离氨基酸含量测定方法精密度及回收率分析第39卷2014年第3期每个分析者测定的样品均值如表1，同时给出了7位粮食游离氨基酸总量具有重现性。分析者的测定平均值，说明本研究采用的方法测定表17位分析者测定的样品游离氨基酸含量(g氨基氮，g干重)注：测定时间是2014年24月份，游离氨基酸总量以平均值4-标准偏差(sD)；A～G代表7位分析者，下同。表2粮食种类之间游离氨基酸含量平均值描述2．1．1粮食品种之间游离氨基酸含量差异分析

9、表4是方差分析结果，给出了组问、组内偏差平表2为描述统计量结果，给出5种粮食分组的方和、自由度、均方、F值和概率P值，p<0．05，说明5样本含量Ⅳ，因变量游离氨基酸含量的平均值、标准个粮食种类游离氨基酸含量均值在=0．