微生物实验教材.ppt

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1、微生物實驗教材微生物實驗教材網頁連結題目：環境中微生物的觀察目的讓學生瞭解環境中有許多的微生物，可能會造成微生物實驗的污染，希望學生在往後的實驗裡能做好無菌的操作，避免污染。材料營養瓊脂平板培養(NA,nutrientagar)實驗步驟：用油性簽字筆先將培養皿劃分成兩區，標示組別、座號、日期、培養基種類（此次的培養基為營養瓊脂平板培養基nutrientagarplates，簡稱NA），將手指輕按於培養基的一區上另外有一平板培養基，將蓋子打開，於空氣中暴露30分鐘將平板培養基倒置放於室溫中，培養24-48小時。觀察平板培養基所長出的菌落，互相比較並計算其數目。試著依大小、形狀、表面狀況

2、、高度、顏色、邊緣等，描述幾個不同之菌落，菌落之外表特徵，可供菌種鑑定時的參考。微生物實驗無菌操作常用器材『接種環』微生物實驗無菌操作常用器材『酒精燈』微生物實驗無菌操作消毒殺菌器材『70％酒精』塑膠培養皿培養基-營養肉湯瓊脂（洋菜膠）使培養基固化Broth（肉湯）液態培養基Slant斜面培養基題目：細菌的接種與純培養目的本次實驗中讓學生練習平板劃線技術(Streak-PlateTechnique)，分離單一菌落藉由此實驗學習基本的無菌操作觀念，與純培養將沾有菌種的接種環在培養基表面劃線，在劃線過程中，細胞逐漸分散，培養後形成單個菌落。材料營養瓊脂平板培養(NA,nutrientag

3、ar)接種環、酒精燈菌種大腸桿菌Escherichiacoli枯草桿菌Bacillussubtilis金黃色葡萄球菌Staphylococcusaureus實驗步驟用油性簽字筆先將培養皿標示組別、座號、日期，另外逆時針標示三區（I、II、III，每一區大約差60~90度）及中間第四區IVIIIIIIIV將接種環前端的環區置於酒精燈上燒紅，放於酒精燈旁冷卻（要確實冷卻），以冷卻的接種環沾取一些菌落。（所以動作儘量在酒精燈周圍）打開培養皿，於第I區輕輕來回塗抹均勻（接種環盡量與培養皿成水平，比較不會劃破培養基），蓋上培養皿。再將接種環用酒精燈燒紅、冷卻。打開培養皿，將培養皿逆時針轉約60

4、~90度，自第I區的尾部，單方向畫線拖往第II區，大約劃8-10條線。蓋上培養皿。再將接種環用酒精燈燒紅、冷卻。打開培養皿，將培養皿逆時針轉約60~90度，自第II區的尾部，單方向畫線拖往第III區，大約劃5-10條線。接種環不燒紅，培養皿再逆時針轉約60~90度，直接從第III區的尾部以Z字形拉線到第四區。接種環需再燒紅一次滅菌。I區III區II區IV區平板劃線技術(Streak-PlateTechnique)題目：影響細菌生長的因素：溫度、pH值目的：本次實驗中讓學生再次練習平板劃線技術(Streak-PlateTechnique)，分離單一菌落與複習無菌操作觀念給學生練習液態培

5、養基的接種技術與斜面培養基的接種方法平板培養基將培養於不同溫度，觀察溫度對細菌生長的影響液態培養基（或稱為肉湯）則是含有不同的pH值，可觀察pH值對細菌生長的影響材料：營養瓊脂平板培養(NA,nutrientagar)液態培養基(broth)接種環、酒精燈菌種（大腸桿菌Escherichiacoli）實驗步驟：四區畫線法的步驟如前所述。液態培養基的接種，將接種環燒紅之外，上面鐵棒部分也要燒過，放於酒精燈旁冷卻（要確實冷卻），沾取一些菌落。將試管蓋口輕輕過火，以右手小拇指打開蓋子，將接種環深入試管底部，輕輕攪拌一會。拿出接種環，瓶口過火，蓋子過火，蓋子套回試管，再過火，接種環需再燒紅一

6、次滅菌。斜面培養基的接種，類似液態培養基接種方法，只有畫菌方式不同。接菌方式如上所述，沾到菌之後將接種環深入試管底部，從下往上慢慢Z字型畫線。拿出接種環，瓶口過火，蓋子過火，蓋子套回試管，再過火，接種環需再燒紅一次滅菌。固態培養基將培養於45℃、37℃、25℃、4℃，液態培養基置於37℃震盪培養。題目：細菌數量的計數方法-平板塗佈法（SpreadPlate）目的常用來計算每ml液體培養基中的細菌數量有三種血球計數器計直接數法、平板計數法、濾膜培養法本次實驗中讓學生練習以平板塗佈法來計數細菌的數量。此種方法簡單、靈敏，廣泛應用於食品、水體及土壤樣品中活的細菌的計數平板計數法得到的結果稱

7、為菌落形成單位(colonyformingunit，CFU)CFU並不完全等同於樣品中的活菌數，菌落數在30-300個內，所計數的結果會較正確材料營養瓊脂平板培養(NA,nutrientagar)液態培養基(broth)L型玻棒、酒精燈菌種（大腸桿菌Escherichiacoli）與所使用的稀釋倍數菌液實驗步驟用油性簽字筆先將培養皿標示組別、座號、日期，與所使用的稀釋倍數菌液。將隔夜培養的大腸桿菌菌液做連續性的稀釋（包含10-1、10-2、10-3、10-