[精品]关于培养基配制的一些原则.doc

《[精品]关于培养基配制的一些原则.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、关于发酵常用培养基的基本原则按用途培养基按其用途可分为抱子培养基、种子培养基和发酵培养基三种。(1)抱子培养基泡子培养基是供菌种繁殖泡子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多优质的抱子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对泡子培养基的基本配制要求是：第一，营养不要太丰富(特别是有机氮源)，否则不易产泡子。如灰色链霉在葡萄糖■硝酸盐■其它盐类的培养基上都能很好地生长和产泡子，但若加入().5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌丝而不长泡子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响泡子量和泡子颜色。第三，要注

2、意泡子培养基的pH和湿度。生产上常用的抱子培养基有：秩皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白瞅牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌抱子培养基，因为它们含氮量少，疏松、表面积大，所以是较好抱子培养基。大米培养基的水分需控制在21%-50%,而曲房空气湿度需控制在90%—1()()%。(2)种子培养基种子培养基是供泡子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌体长得粗壮，成为活力强的“种子S所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达到较高的溶

3、解氧，供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程屮能维持稳定的pH,其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激泡子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长，所以在种子培养基屮常包括有机及无机氮源。最后一级的种子培养基的成分最好能较接近发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，快速生长。(3)发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长，达到一•定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此，发酵培养基

4、的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。培养基成分和配比的选择培养基的组分（包括这些组分的来源和加工方法）、配比、缓冲能力，粘度，消毒是否易彻底，消毒后营养破坏程度，及原料屮杂质的含量都对菌体的生长和产物形成有影响。但H前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基配方。H前还只能是在生物化学、细胞生物学等的基本理论指导下，参照前人

5、所使用的较适合于某-•类菌种的经验配方，再结合所用菌种和产品的特性，采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备，对碳源、氮源、无机盐和前体等进行逐个单因子试验，观察这些因子对菌体生长和产物合成量的影响。最后再综合考虑各因素的影响，得到-•个比较适合本菌种的生产配方，以求得到高产。为了加快试验时间，可考虑用“正式试验设计"等数学方法來确定培养基组分和浓度，它可以通过比较少的实验次数而得到较满意的结果。另外还可通过方差分析，了解哪个因素影响较大，以引起人们的注意。在考虑培养基总体要求时，要注意一些问题。第一，考虑碳源、氮源时，要注意快速利用的碳（氮）源

6、和慢速利用的碳（氮）源的相互配合，发挥各自的优势，避其所短。第二，选用适当的碳氮比。培养基小氮比的影响极为明显。氮源过多，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢产物的积累，氮源不足，则菌体繁殖量少,从血影响产量，碳源过多，则容易形成较低的pH,若碳源不足，易引起菌体衰老和自溶。另外碳氮比不当还会影响菌体按比例地吸收营养物质，直接影响菌体的生长和产物的形成。菌体在不同的生长阶段，其对碳氮比的最适要求也不一样。一般碳源因为既作碳架又作能源，因此用量要比氮多。从元素分析來看，酵母菌细胞屮碳氮比约为100：20,霉菌约为100：10；—般工

7、业发酵培养基的碳氮比约为100：0.2-2.0；但在氨基酸发酵屮，因为产物屮含氮多，所以碳氮比就要相对高一些。例如谷氨酸生产屮取碳氮比100：15-21,若碳氮比为100：0.5—2.0,则会出现只长菌体，而几乎不合成谷氨酸的现象。碳氮比随碳水化合物及氮源的种类以及通气搅拌等条件血异，很难确定一•个统一•的比值。第三，要注意生理酸、碱性盐和pH缓冲剂的加入和搭配。这是根据该菌种在现有工艺设备条件下，其生长合成产物时pH变化情况，以及最适pH控制范围等，综合考虑选用什么生理酸碱性物质及其用量，从而保证在整个发酵过程小pH都能维持在最佳状态

8、（有时也可考虑用中间补料来控制pH）。培养基成分的用量的多少，大部分是根据经验而來。但有些主要代谢的产物因为它们的代谢途径比较清惣，所以可以根据物料平衡计算来加以确定，例如在酒精生产屮可根据淀粉的用量计算洒