储藏温度和时间对转基因大豆外源基因及蛋白的影响-论文.pdf

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1、南京农业大学学报2012，35(6)：131—136JournalofNanjingAgriculturalUniversity周兴虎，祝常青，吴洪洪，等．储藏温度和时间对转基因大豆外源基因及蛋白的影响[J]．南京农业大学学报，2012，35(6)：131—136储藏温度和时间对转基因大豆外源基因及蛋白的影响周兴虎，祝常青，吴洪洪，沈文飚，周光宏，黄明(1．南京农业大学国家肉品质量安全控制工程技术研究中心，2．南京农业大学生命科学学院，江苏南京210095)摘要：采用PCR和Western—blot方法，研究了储藏过程中

2、不同温度(4、25和37℃)和不同时间(10、30、50、70和90d)对转基因大豆外源c一epsps基因和EPSPS蛋白的影响。结果表明：在储藏过程中外源cp4一epsps基因没有发生明显变化；外源EPSPS蛋白发生轻微降解，降解产物相对分子质量约为46．2×10，而且37℃降解条带较25℃明显，说明相对较高的温度(25和37℃)在储藏90d期间能够促进外源EPSPS蛋白的降解，而对基因完整性影响较小。关键词：转基因大豆；c一epsps基因；储藏温度；储藏时间；PCR；Western—blot中图分类号：TS214．2

3、文献标志码：A文章编号：lO00—2030(2012)06—0131—06Efectsofthestoragetemperatureandtimeoncp4-epspsgeneandproteiningeneticallymodifiedsoybeanZHOUXing．hu，ZHUChang．qing，WUHong．hong。SHENWen—biao。ZHOUGuang—hong，HUANGMing，，(1．NationalCenterofMeatQualityandSafetyControl，2．CollegeofLi

4、feSCience，NanjingAgriculturalUniversity，Naming210095，China)Abstract：Inthisstudy，theeffectofdifferentstoragetemperatures(4，25，37℃)andtimes(10，30，50，70，90d)onexogenouscp,一epspsgeneandproteinofgeneticallymodifiedsoybeanwasinvestigatedbyPCRandWestern—blotmethods．Ther

5、esultssuggestedthattherewerenoobviouschangesinnucleicacidduringthestorageperiods．However，thedegradationproduct(relativemolecularmass46．2xlOofEPSPSproteinwasdetectedat25qcand37℃．Theconclusionrevealedthatthestoragetemperatureandtimecanpromotethedegradationofexogeno

6、usEPSPSprotein，butexeflnoeffectonintegrityoftheexogenouscp4一epspsgeneduringthestorageperiod(90days)．Keywords：geneticallymodifiedsoybeanxp4一epspsgene；storagetemperature；storagetime；PCR；Western—blot近年来，转基因的物种越来越多，从单一的转基因棉花，发展到转基因大豆、转基因玉米和转基因奶牛等¨。转基因作物商业化应用的安全性，引起消费

7、者的广泛争议，因此转基因食物安全以及溯源检测成为一个值得关注的方向J。目前大多数研究表明在食品的加工过程中，多种加工因素对转基因外源基因和蛋白的完整性都有影响LsI。加工中的微波、高温和破碎等物理因素会使转基因大豆粉中外源一epsps基因和内源lectin参照基因的含量均随着加工的程度而减少J。Vijayakumar等证明了在经过180℃焙烤15min后的饼干中，转基因玉米和大豆外源基因片段长度降解到300bp以下；梁克红在转基因大豆饲料研究过程中发现，在50℃干热的加工条件下，随着加工时间的延长，外源EPSPS蛋白质印

8、迹的杂交信号逐渐减弱。在实际加工生产过程中，储藏是所有原料必不可少的阶段。储藏过程中外源epsps基因及其蛋白(EPSPS)是否存在变化目前尚无研究，但有研究表明储藏条件(温度、湿度、时问)对粮食品质以及内源成分存在一定的影响，其中赖氨酸含量受储藏时间和温度影响较大，湿度次之_9]。同时储藏温度与时问对糙米最低黏度的