外源铁蛋白基因NtFerl对粳稻生理影响的研究-论文.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2014。42(23)：7718—7722责任编辑李占东责任校对况玲玲外源铁蛋白基因NtFerl对粳稻生理影响的研究唐鑫华1,2，张磊，姜延渡，杨传平，高红秀，邹德堂。(1．东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150040；2．东北农业大学农学院，黑龙江哈尔滨150030)摘要[目的]验证铁蛋白基因的功能，提高转基因粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。[方法]利用农杆菌介导法将烟草铁蛋白基因r1导入粳稻基因组。[结果J对、T代卡那霉素抗性植株PCR、Southern杂交、Nort

2、hern杂交和RT—PCR检测分析表明，外源基因已整合到粳稻基因组中，并能够稳定遗传表达。转基因粳稻超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和叶绿素相对含量高于对照，丙二醛(MDA)含量低于对照，其根、叶片和糙米中铁含量均高于对照。接种稻瘟病病菌后转基因植株叶瘟指数低于对照。[结论l转入外源铁蛋白基因M凡r1能够提高粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性关键词铁蛋白；转基因；粳稻；稻瘟病中圈分类号S188文献标识码A文章编号0517—6611(2014)23—07718—05ResearchofExogenousFerritinGeneNtFe

3、nonPhysiologicalEfectsofJaponicaTANGXin-hua，ZOUDe-tangetal(StateKeyLaboratoryofGeneticsandTreeBreeding，NortheastForestryUniversity，Harbin，Hei—longjiang150040；CollegeofAgricuhure，NortheastAgricuhuralUniversity，Harbin，Heilongjiang150030)Abstract10biectivelTheaimwastoverifyfunctionofexogen

4、ousferritingeneNtFerl，improvetheironcontentofandresistancetosaltstressandstressoftransgenicjaponicarice．[Method]Mr1genewastransformedintojaponicagenomebyagrobaeterium—mediatedtoinves-tigateitsfunctioninplant．IResult1ThePCR，Southernblo，NorthernblotandRT—PCRtestsshowedthattheexogenousgene

5、hadbeeninte—gratedintothegenomeandcouldexpressinT0，Tlgeneration．TheSODactivityandMDAcontentoftransgenicjaponicawerelessthanthecontrol，whileCATactivityandchlorophyllcontentweremorethanthecontrol，ironcontentintheroot．1eavesandbrownriceoftransgeniconesweremorethanthecontro1．Leafblastindexo

6、ftransgeniconeswaslessthanthecontro1．jConclusionlExogenousferritingeneNtFerlcouldimprovetheironcontentofandresistancetosaltstressandstressoftransgenieiaponicarice．KeywordsFerritin；Transgenic；Japonica；Riceblast铁蛋白(Ferritin)广泛存在于生物体中，是由24个同源1材料与方法或异源亚基组成的450kD复合体，由1个球形蛋白质外壳包1．1材料试验使用的粳稻品种

7、为松粳6(Songjing6)，娴草裹，铁离子能够在这种复合体中浓缩，每个铁蛋白分子可以铁蛋白基因NtFerl(GenBank登录号：AB083924)由东北林业储藏0～4500个可溶的、无毒的、可利用的铁离子，是迄今唯大学林木遗传育种国家重点实验室前期研究获得。烟草铁一能够调控铁离子从固相转到液相的蛋白。铁蛋白的蛋白NtFerl基因cDNA编码区全长756bp，编码251氨一个主要作用是储存铁离子，作为植物体光合作物和固氮的基酸。铁源；另一个主要作用是作为胁迫反应蛋白，促进过剩铁离1．2方法子的储藏。1．2．1载体构建与农杆菌培养。将获得的烟草铁蛋