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《版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、云南农业大学学报JournalofYunnanAgriculturalUniversity,2014,29(5):661—665http://xb.ynau.edu.onISSN1004—390X;CODENYNDXAXE—mail:xb@ynau.edu.enDOI:10.3969/j.issn.1004—390X(n).2014.05.007版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究查星琴,潘伟荣,肖晶,成文敏,信吉阁,卿玉波,刘海京,曾养志(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;(2.云南农业大学,云南省版纳微型猪近交系重点实验
2、室,云南昆明650201)摘要:本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系(Bannamini—piginbredline,BMI)耳组织的消化效果,探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响。用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞,建立耳组织成纤维细胞系,比较一8O℃条件下分别保存3,5,7,30d后冻存效果。结果表明:BMI仔猪成纤维细胞具有典型的成纤维细胞特征;生长曲线呈“s”形,倍增时间为37.1h;一80oC冻存3,5,7d的成纤维细胞存活率与液氮保存(93.74%)差异不显著(P>0.05),冻存30d的存活率(79.38%)
3、显著低于其他各组(P<0.05),但经48—72h培养后仍能贴壁生长。因此,可得出此结论:采用胶原酶Ⅳ消化法可消化BMI耳组织成纤维细胞,而且该细胞在一80℃条件下能进行短期保存。’关键词:BMI(版纳微型猪近交系);成纤维细胞;胶原酶1V;冷冻保存中图分类号:S814.8;S828文献标志码:A文章编号:1004—390X(2014)05—0661—05TheEstablishmentandStudyonCry0preserVati0nMethodofFibroblastCellLineofBannaMini-pigInbredLineZHAXingqin
4、,PANWeirong,XIAOJing,CHENGWenmin。,XINJiege,QINGYubo,LIUHaijing,ZENGYangzhi(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China;2.KeyLaboratoryofBannaMini-pigInbredLineofYunnan,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)Abstract:Thisexperimen
5、twasconductedtostudythedigestioneffectofcollagenaseonBannamini—pigInbredLinefBMI)eartissueandtheeffectofdiferentcryopreservationmethodsonviablerateoffibroblast.WeculturedtheprimaryearfibroblastcellbyusingcollagenaseIVdigestionof60dayoldpigletofBMI,andestablishedtheearfibroblastcell
6、line.Andthen,wecomparedtheeffectsofcryo.preservationunder一80℃fordifferenttime(3,5,7,3Od).TheresultsshowedthatthefibroblastofBMIexhibitedtypicalfibroblastmorphology.Thegrowthcurvewas“S’’shapeandthedoublingtimewas37.1h.Thesurvivalrateoffibroblastcellinthesegroupsof一80ccfrozenf0r3,5,7
7、dshowednosignificantdifferencewithliquidnitrogenpreservationgroup(97.41%)(P>0.05).Thesurvivalrateinthegroupof一8OoCfrozenfor30dwassignificantlylowerthanthatofothergroups(P8、02—25网络出版时间:2014—09—1316:5
8、02—25网络出版时间:2014—09—1316:5
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