版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究-论文.pdf

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1、云南农业大学学报JournalofYunnanAgriculturalUniversity，2014，29(5)：661—665http：／／xb．ynau．edu．onISSN1004—390X；CODENYNDXAXE—mail：xb@ynau．edu．enDOI：10．3969／j．issn．1004—390X(n)．2014．05．007版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究查星琴，潘伟荣，肖晶，成文敏，信吉阁，卿玉波，刘海京，曾养志(1．云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明650201；(2．云南农业大学，云南省版纳微型猪近交系重点实验

2、室，云南昆明650201)摘要：本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系(Bannamini—piginbredline，BMI)耳组织的消化效果，探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响。用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞，建立耳组织成纤维细胞系，比较一8O℃条件下分别保存3，5，7，30d后冻存效果。结果表明：BMI仔猪成纤维细胞具有典型的成纤维细胞特征；生长曲线呈“s”形，倍增时间为37．1h；一80oC冻存3，5，7d的成纤维细胞存活率与液氮保存(93．74％)差异不显著(P>0．05)，冻存30d的存活率(79．38％)

3、显著低于其他各组(P<0．05)，但经48—72h培养后仍能贴壁生长。因此，可得出此结论：采用胶原酶Ⅳ消化法可消化BMI耳组织成纤维细胞，而且该细胞在一80℃条件下能进行短期保存。’关键词：BMI(版纳微型猪近交系)；成纤维细胞；胶原酶1V；冷冻保存中图分类号：S814．8；S828文献标志码：A文章编号：1004—390X(2014)05—0661—05TheEstablishmentandStudyonCry0preserVati0nMethodofFibroblastCellLineofBannaMini-pigInbredLineZHAXingqin

4、，PANWeirong，XIAOJing，CHENGWenmin。，XINJiege，QINGYubo，LIUHaijing，ZENGYangzhi(1．CollegeofAnimalScienceandTechnology，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China；2．KeyLaboratoryofBannaMini-pigInbredLineofYunnan，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China)Abstract：Thisexperimen

5、twasconductedtostudythedigestioneffectofcollagenaseonBannamini—pigInbredLinefBMI)eartissueandtheeffectofdiferentcryopreservationmethodsonviablerateoffibroblast．WeculturedtheprimaryearfibroblastcellbyusingcollagenaseIVdigestionof60dayoldpigletofBMI，andestablishedtheearfibroblastcell

6、line．Andthen，wecomparedtheeffectsofcryo．preservationunder一80℃fordifferenttime(3，5，7，3Od)．TheresultsshowedthatthefibroblastofBMIexhibitedtypicalfibroblastmorphology．Thegrowthcurvewas“S’’shapeandthedoublingtimewas37．1h．Thesurvivalrateoffibroblastcellinthesegroupsof一80ccfrozenf0r3，5，7

7、dshowednosignificantdifferencewithliquidnitrogenpreservationgroup(97．41％)(P>0．05)．Thesurvivalrateinthegroupof一8OoCfrozenfor30dwassignificantlylowerthanthatofothergroups(P

8、02—25网络出版时间：2014—09—1316：5