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《中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测医学杂志2003;20(4):594~596J151omedLng中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测*一李胜富于萍张立步宏'△李幼平曾养志.1(四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室,成都610041)2.(四川大学华西医院病理科)3(云南农业大学遗传资源研究所)摘要采用Roche公司的RT(Reversetranscriptase,RT)检测试剂盒,按其操作步骤进行,用HIV一1作为试剂盒的阳性参照绘制标准曲线,
2、PK15作为猪内源性逆转录病毒(Porcineendogenousretrovirus,PERV)的阳性对照,定量检测34头中国版纳微型猪近交系(Bannaminipiginbreed,BMI)血浆中表达的PERV的逆转录酶.各猪RT结果均于405nm处测定OD值,用HIV一1的实测标准曲线进行定量(pg/m1).检测结果表明全部34头猪均为阳性反应,但各猪血浆中有活性的酶远低于HIV一1,也弱于PK15细胞株的培养上清.关键词异种移植人一兽共患病猪内源性逆转录病毒逆转录酶TheQuantity
3、AnalysisofReverseTranscriptaseinPorcineEndogenousRetrovirusExpressedinBannaMinipiglnbreed,'LiShengfu.YuPingZhangLi.BuHong'LiYoupingZengYangzhi'1(KeyLaboratoryof7'ransplantEngineeringandImmunology,MinistryofHealth-WestChinaHo~italofSichuanUniversity,C
4、hengdu610041)2(DepartmentofPathology,[VestChinaHospitalofSichuanUniversity.Chengdu610041)3(1abofGeneticResources,YunnanAgricultureUniversity)AbstractQuantitativeRT(reversetranscriptase)assaywasestablishedtodetectthereversetranscriptaseinplasmaofthirt
5、y—fourChineseBannaminipiginbreedinthiswork.TheprotocolwasgivenintheRTkit(Roche),usingHIV一1asthepositivecontrolofthekitandsupernatantofPK-15asthePERVpositivecontrolrespectively.Theresultsshowthatpositivereversetranscriptasereactioncanbedetectedinthepl
6、asmaofthepigs,butthelev—elsaremuchlowerthanthatofHIV一1andlowerthanthatofPERVinsupernatantofPK-15.KeywordsXertotranspIantationXenozoonosisPorcineendogenousretrovirus(PERV)ReversetranscriDtase1前言猪到人异种移植可能是解决目前供器官不足的重要途径之一.但对猪内源性逆转录病毒(Porcineendogenousr
7、etrovirus,PERV)引起的人兽共患病(Xenozoonosis)及其传播危险性的担心阻碍了异种移植的进展L1].目前国内外研究均发现PERV可在体外感染人源细胞[2],但在体内,无论是猪胰岛和皮肤移植给人[3],还是猪肾脏与病人体外桥接],均未发现PERV在体内感染人的证据.Vanderlaan*国家自然科学基金资助项目(30070725)△联系人.E—mail:hongbu@hotmail.com2000年报道的猪胰岛细胞移植给SCID小鼠后,PERV可感染小鼠并在鼠体内传播使人们重
8、新思考这个问题Is].目前PERV的传播危险性无定论,因此对PERV的研究仍是异种移植进入临床应用之前必须解决的首要问题.我国拥有世界上唯一的近交系猪——版纳微型猪近交系,有可能成为世界上最先进行异种移植临床应用的国家之一,但对其PERV的研究较少,本实验用Roche公司的RT试剂盒,定量检测版纳微型猪血浆中逆转录酶的活性.2材料与方法2.1血样的采集34头BMI的抗凝全血采自云南西双版纳养猪第4期李胜富等.中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测场,前腔静脉采血,所有血样均用肝素抗
