《高效液相色谱荧光检测法测定22种桑叶中1-脱氧野尻霉素含量的研究》.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAsh．Sci．2015。43(2O)：1—3责任编辑刘月娟责任校对李岩高效液相色谱荧光检测法测定22种桑叶中1一脱氧野尻霉素含量的研究徐斌，张东阳，刘利，李龙，．武国华，(1．江苏科技大学环境与化学工程学院，江苏镇江212000；2．江苏科技大学生物技术学院蚕业研究所，江苏镇江212000)摘要[目的]采用柱前衍生高效液相色谱荧光检测法(HPLC—FLD)，对22种桑叶中1一脱氧野尻霉素(DNJ)的含量进行测定。[方法]采用水浴超声提取法提取桑叶中的DNJ，以9．芴甲氧羰酰氯(FMOC—C1)为衍生化试剂，在p

2、H8．5的KBO缓冲液中对DNJ进行衍生，生成的荧光物质FMOC—DNJ用高效液相色谱荧光检测法检测。色谱流动相为乙腈一浓度0．1％乙酸水溶液。同时，对分离条件做了改进。采用梯度洗脱的方法对桑叶提取物中衍生化的DNJ进行分离。[结果]该方法的线性范围为2．02～4

3、D．50u#ml，线性相关系数为0．9991；方法检出限、定量限分别为0．15、0．50m1。对样品进行加标回收试验，回收率范围为93．73％一97．91％。[结论]该方法用于测定桑叶中DNJ的效果令人满意。关键词高效液相色谱法；衍生化；荧光检测；桑叶；1一脱氧野尻霉素中图分类号s一03文献标

4、识码A文章编号0517—6611(2015)20—001—03Determinationof1-deoxynojirimycinin22KindsofMulberryL，eaVesUsingHigh-performanceLiquidChromatographywithaFluore~cenceDetectorXUBin。ZHANGDong-yang2，LIULi，WUGuo-hua”etal(I．SchoolofEnvironmentalandChemicalEngineering，JiangsuUniversityofScienceandTechno

5、logy，Zhenjiang，Jiangsu212018；2．CollegeofBiotechnologyandScriculturalResearchInstitute，JiangsuUn盱sjtyofScienceandTechnology，Zhe~iang，Jiangsu212018)Abstract[Objective]Thecontentsof1-deoxynojirimycin(DNJ)in22kindsofmulberryleavesweredeterminedbyderivatizationwith9-flu—orenylmethylch

6、loroformatefollowedbyhigh—performanceliquidchromatographyequippedwithafluorescencedetector(HPLC·FLD)．[Method]DNJwasextractedfrommulberryleavesbywaterbathandultrasonicextraction，thenderivatizedusingFMOC．C1inK1BObufersolution(pH8．5)．ThefluorescentproductFMOC—DNJwasdetectedbyHPLC—FL

7、D．Themobilephasewasacetonitrileandwater(containing0．1％aceticacid)．Theelutionprocesswasoptimized，whichwasdiferentfromthearticlesreportedbefore．ThederivatizedDNJintheextractsofmulberryleaveswasseparatedbyagradientelution．[Result]Thelinearrangeofthemethodis2．02—4I)．50mg／Landthecorre

8、lationcoeficient()is0．9991．Thelimitsofdetection(LOD)andquantification(LOQ)ofthemethodare0．15and0．50ml，respectively．Therangeofrecoveryisshowntobe93．73％-97．91％．[Conclusion]TheeffectofquantifyingDNJinmulberryleavesissatisfactorybytheoptimizedHPLC—FLDmeth—od．KeywordsHighperformanceli

9、quidchromatography；Derivatization；Fluore