顺铂增加人Hela细胞放疗敏感性涉及细胞周期的研究.pdf

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1、·820·江苏医药杂志2002年11月第28卷第11期JiangsuedJ，November2002，o28，No.11·实验研究·顺铂增加人ea细胞放疗敏感性涉及细胞周期的研究刘颖刘永彪施奕【摘要】目的探讨小剂量顺铂增加人ea细胞对电离辐射敏感性涉及细胞周期动力学的机理。方法将ea细胞分为空白对照组、单纯放疗组、单纯化疗组和放疗加化疗组，用流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期变化，采用P免疫组化法检测ea细胞受作用后5基因蛋白表达情况。结果单纯放疗、单纯化疗均可诱导ea细胞凋亡，而放疗加化疗组细胞凋亡率明显增加，经顺铂作用后，ea细胞周期发生明显变化，表现为期减少、期和／期增加

2、，突变型5表达减弱。12结论小剂量顺铂可通过改变培养的人ea细胞周期，诱导细胞／期延迟从而提高放疗敏感2性，可能与其内在的5基因表达改变有关。【关键词】顺铂放疗敏感性细胞周期免疫组织化学Studyoncisplatin*seffectsontheenhancementofthesensitivityofradiotherapyofhumanhelacelllinesthroughcell-cyclekineticsLIUYing，LIUYongbiao，S~IYi.DePartmentofObstetricsandGyne-cology，Affiliated~osPitalof

3、Xuzhoumedicalcollege，Xuzhou221002【Abstract】ObjectiveToinvestigateoWdosecisatinintheenhanceinoutofthesensitivityofra-diotherayofhumaneaceinesthrouthadjustingce-cycekinetics.MethodsTheeacesWeredi-videdintofourgrous（controgrou，radiationony，chemotherayony，radiationandchemotheray），foW-cytometryWa

4、sintroducedinthestudyofthececycesandaotosisofeaces，andimmunohistoche-mistryof5rotein.ResultsRadiationandchemotheraybothcoudinduceeacesaotosis，cisatincoudobviousyenhanceeacesaotosisinducedbyradiation，andcisatincoudchangece-cyceofeaceines，1hasecesdecreaseand2／hasecesincrease.ConclusionLoWdosec

5、isatincanenhancethesensitivityofradiotheraythroughchangececyceofeaceines.【Keywords】CisatinRadiosensitivityCe-cyceImmunohistochemistry放疗是宫颈癌治疗的重要方法之一。近年来关二、ea细胞体外处理：取对数生长期细胞进于药物加放射治疗对肿瘤治疗起到增敏、增效作用行分组实验，每个实验组设6个平行对照（1）空白对的研究越来越多，以期获得理想的增加放疗敏感性照组：细胞不进行处理直接收集待测。（2）单纯放疗而又不增加毒副作用的临床用药。本研究利用流式组：分别给

6、予2、4、6、8、10y的X线照射，采用进口细胞仪和免疫组化法对培养的人ea细胞经小剂西门子直线加速器单次照射。（）单纯化疗组：在培量顺铂作用后，从其细胞周期动力学的变化及调节养基中加入顺铂使其终浓度为0／m。（4）放!mo蛋白探讨其放疗增敏效应的机理。疗加化疗组：放疗前12小时给予0／m的顺!mo资料与方法铂，再进行不同剂量的照射。一、细胞培养：宫颈鳞状上皮细胞癌ea细胞三、流式细胞仪检测：流式细胞仪为美国BD公株由中国科学院上海细胞生物研究所提供。培养基司生产的FACcaibur型，用含0.25%胰酶和为RPI1640（美国IBICo公司），配制成含10%0.02%EDTA

7、的消化液消化细胞后以1000转／分速胎牛血清、100IU／m青霉素和0.1mg／m链霉素，度离心，再用PB洗2遍，用1m预冷的70%乙醇在7C、5%CO2孵箱中培养，用0.25%胰酶和固定置4C冰箱过夜，次日取固定后106个细胞，0.02%EDTA消化传代，实验期间不断冻存。PB漂洗2遍，1mPB混匀细胞，加入RNA酶至终浓度为50／m，7C水浴1小时后放入冰浴中，!g作者单位：221002徐州医学院附属医院（刘颖）；徐州医学院肿再加入PI至终浓度为50!g／m，4C避光染色半小瘤研究所（刘