顺铂对hela细胞辐射增敏体外实验探析研究

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1、顺钳对Hela细胞辐射增敏体外实验探析研【摘要】目的：分析顺钳对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性和辐射增敏作用，以及射线与顺钳联合应用时的效应关系。方法：采用MTT法检测Hela细胞在不同浓度和辐射剂量下的细胞抑制作用；当辐射和顺钳联合应用时，检测细胞抑制率，分析顺铀与辐射联合应用时协同效应的条件。结果：细胞抑制率随药物浓度增加而增大；单纯辐射组细胞抑制率随着剂量增加而增加；单纯顺铀组细胞抑制率随着浓度增加而增加；辐射+顺钳组细胞抑制率随着辐射剂量增加而升高；结论：顺铠和辐射联合应用对宫颈癌Hela细胞增殖有明显的抑制效果，建议应尽早的应用顺铀增敏化疗。【中图分类

2、号】R965.1【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2014)03-0302-01顺钳是临床中最常用的化疗增敏药物之一，目前国内外的众多临床治疗之中普遍采用同步放化疗的综合治疗模式，通过应用小剂量的化疗药物，增加放射线对肿瘤细胞的杀伤作用。但是，化疗药物和放射线都对细胞有着严重的毒副作用，使临床中的多数患者难以接受。此次研究实验，只要针对辐射剂量与顺铠浓度之间的影响效应。1资料与方法1.1Hela细胞对顺苗敏感性的测定将Hela细胞悬液接种于96孔培养板中，每孔100uLo参考研究报道［1］将顺钳确定从低到高8个浓度。培养箱中培养24h,实验孔中加入

3、适量药物培养24ho终止培养后每孔加入20uLMTT试剂，混均后继续培养4h。弃上清、加入150uL二甲基亚枫，震荡仪震荡20min,酶标仪上490nm波长检测各孔吸光度值，每组取5个复孔的平均值，通过公式计算细胞抑制率［2］。细胞移植率=1-（实验组吸光度值/对照组吸光度值）X100%,计算半数致死浓度（IC50）值。1.2照射方法所有照射均匀室温下照射，采用6MV-X线，剂量率4Gy/min,分别一次性给予各实验组6、8、10、12、14、15Gy和0、4、8、12Gy辐射剂量，源板距100cm。1.3MTT法测定顺钳的辐射增敏性将细胞分为4组，空白对照组、

4、单纯辐射组、单纯顺钳组、辐射+顺钳组。空白对照组只加细胞与培养；单纯辐射组按辐射剂量为6、8、10、12、14、15Gy共6个组；单纯顺鉗组药物浓度根据顺鉗IC50值，确定顺铠浓度分别为1、2、5、8、10ug/mL；辐射+顺钳组辐射剂量和药物浓度分别如单纯辐射组剂量和单纯钳组浓度，共30组，每组设5个平行样本。测定各组吸光度值后通过公式计算细胞抑制率。1.4集落形成法观察顺钳对Hela细胞的辐射增敏作用按辐射剂量0、4、8、12Gy分为4个组，于25mL培养瓶中分别接种一定数量的细胞，每组分别设单纯辐射组、辐射+2ug/mL顺铠（待细胞贴壁后加入顺铀，使其终浓

5、度为20%IC50[3]）,每组设3个平行样本。存活分数的计算方法为：实验组克隆形成率/对照组克隆形成率，采用“多靶单击模型”拟合细胞存活曲线，计算辐射增敏比。1.5统计方法采用SPSS17.0软件处理，数据符合正态性和方差齐性,且是多组比较，故进行方差分析，Graphadprism拟合细胞存活曲线，MATLAB绘制抑制率曲线图，协同效应分析时将实验所得值与理论值进行t检验分析，P