莱菔硫烷对人膀胱癌细胞生长的影响及机制研究.pdf

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1、518ActaNutrimentaSinica,Dec.,2006,Vol.28No.6莱菔硫烷对人膀胱癌细胞生长的影响及机制研究单毓娟，吴坤，夏薇（哈尔滨医科大学营养与食品卫生学教研室，哈尔滨150086）【摘要】目的：研究莱菔硫烷（sulforaphane，SFN）对人膀胱癌细胞生长的影响及作用机制。方法：以人膀胱癌细胞系T24细胞为离体研究对象，通过AO/EB荧光染色观察SFN诱导T24细胞凋亡核形态改变；采用流式细胞仪检测SFN对T24细胞周期的影响；RT-PCR法和Westernblot法检验SFN在mRNA和蛋白水平上对TrxR表达的影响。结果：（

2、1）10μmol/L和20μmol/LSFN作用T24细胞24h和48h后，荧光显微镜下可见细胞核碎裂和凋亡小体的出现。（2）流式细胞仪检测可见，SFN能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期，20μmol/LSFN作用48h后，在G0/G1峰之前出现凋亡峰。（3）RT-PCR结果：10μmol/LSFN作用T24细胞4h，10h，24h，TrxRmRNA表达有所增加，20μmol莱菔硫烷作用10h，24h后，TrxRmRNA表达明显增加。（4）Westernblot分析表明，10μmol/LSFN作用T24细胞24h和20μmol/LSFN作用T24细胞8h和2

3、4h后，TrxR蛋白表达有明显增加。结论：SFN能抑制T24细胞的生长，诱导T24细胞凋亡并使其细胞周期阻滞于G0/G1期，其作用机制与诱导TrxR的转录和翻译水平有关。[营养学报，2006，28（6）：518－521]关键词：莱菔硫烷；膀胱癌；硫氧还蛋白还原酶；醌还原酶中图分类号：R151.41文献标识码：A文章编号：0512-7955（2006）06-0518-04EFFECTOFSULFORAPHANEONTHEGROWTHOFHUMANBLADDERCANCERCELLANDITSMECHANISMSHANYu-juan，WUKun，XIAWei（De

4、partmentofNutritionandFoodHygiene,PublicHealthCollege,HarbinMedicalUniversity,Harbin150086,China）【Abstract】Objective：Tostudytheeffectofsulforaphane(SFN)onthegrowthofhumanbladdercancercellanditsmechanisminvitro.Method：MorphologicalcharacteristicsofT24cellnucleusinducedbySFNwereobserv

5、edbyAO/EBfluoresceinstaining.TheeffectofSFNontheT24cellcyclewasdeterminedbyflowcytometry.TheexpressionofTrxRatthetranscriptionalandtranslationallevelsweremeasuredbyRT-PCRandWesternblotmethodsrespectively.Results：(1)Afterthecellsweretreatedwith10µmol/Land20µmol/LSFNfor24hand48h,nucle

6、arfragmentationandapoptoticbodywereseenunderfluorescencemicroscope.(2)SFNcouldblockthecellcycleattheG0/G1phaseshowedbyflowcytometry.Moreover,thetreatmentof20µmol/LSFNfor48hcouldcausetheappearanceofsub-G1beforeG0/G1phase.(3)TheexpressionofTrxRmRNAwereincreasedbythetreatmentof10µmol/L

7、SFNfor4h,10h,24h,comparedwiththecontrolgroup.Furthermore,thetreatmentwithhighdoseSFN(20µmol/L)for10hor24hcouldinducetheexpressionofTrxRmRNAmoresignificantly.(4)TheexpressionofTrxRproteininthe10µmol/LSFNfor24hgroupwasaugmentedcomparedwiththecontrolgroup,andafter收稿日期：2006-05-29基金项目：黑龙

8、江省教育厅科学技术研究项目（No.10