乙肝病毒与乙肝病毒标志物的相关性研究.pdf

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1、国际检验医学杂志2012年l2月第33卷第23期IntJLabMed，December2012，Vo1．33，No．23E3]KalJ，BorgyaA，OallusserA，eta1．DevelopmentofanoverN—ter—功能的相关性EJ]．中国生产业，2012，9(18)：88．mail3／ProBNP(NT—ProBNP)assaywithalowdetectionlimitE8]马锦洪，姜庆波．NT—proBNP在心力衰竭诊断中的价值．吲际EJ]．ScandJClinLadInvestSuppl，1999，17

2、(4)：177181．检验医学杂志，2011，32(20)：23552356．E4]郝彬．脑钠肽在缺血性心力衰竭诊治过程中的应用口]．中国实用[9]薛旗，邵玉枝．NT—ProBNP的临床检测与应用[J]．I{I嘲实用医医药，2008，36(3)：166．药，2()l2，7(13)：108109．Es]初贵富．血浆N一末端脑钠肽前体对急性呼吸困难病因的鉴别诊[10]袁劲松，陈文．N末端脑利钠肽原在心力衰竭中的临床应用进展断价值EJ]．中国实验诊断学，2012，16(4)：700—701．[j]．国际检验医学杂志，20l0，31(1

3、2)：l4l7I419．E61覃向红．慢性阻塞性肺疾病合并心力衰竭的临床特点及护理[J]．中国医药导刊，2009，11(2)：301—302．(收稿日期：2O1206l9)E7]周雁花，王月香．NT—proANP、NTi~roBNP的监测与心衰患者心·经验交流·乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的相关性研究叶儒军，魏威(1．梁平县人民医院检验科，重庆梁平405200；2．南方医科大学生物技术学院，广东广州5105l5)摘要：目的探讨乙型肝炎病毒标志物的检测与其DNA的关系。方法取乙肝患者与阴性对照组患者的血液，提取血液总RNA后进行

4、逆转录，再用实时荧光定量PCR检测乙肝标志物，如HBsAg，HBeAg，PreS2。结果定量PCR发现乙肝患者比对照组HBsAg，HBeAg，PreS2均上调。结论可以用荧光定量PCR检测乙肝病毒标志物来鉴定乙肝患者。关键词：肝炎病毒，乙型；DNA；聚合酶链反应DOI：10．3969／j．issn．16734130．2012．23．060文献标识码：B文章编号：1673—4130(2012)23—2932—02乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是1种由乙型肝炎病毒因的ct值(域值循环数)，采用AA('t的方法进仃相刈定，(HBV)感染机

5、体后所引起的疾病。HBV主要存在于肝细胞PCR反应的条件：(30s，95C；5s，95C；31s，60C)，反应勾内并损害肝细胞，引起肝细胞炎症、坏死、纤维化。传统方法检4O个循环。测HBV都需要一定的时间，选用分子生物学中的荧光定量1．5统计学处理采用SPSS16．0统汁软件包进干于统¨学处PCR的方法来检测乙肝病毒标志物如HBsAg，HBeAg，PreS2理。统计方法为计量资料两组间比较采用配对榆验，数资的基因水平来鉴定乙肝患者，这是1种快速而且准确的方法。料采用Y。检验，组内比较及治疗前后的比较用方差分析。1资料与方法2结

6、果1．1一般资料取已知的乙肝患者3O例的血液和阴性对照组2．1荧光定量PCR溶解曲线及扩增曲线分析随机抽取样3O例血液，随机配对成3O组，血液收集后均放在80C冰箱。品，通过溶解曲线图及扩增曲线分析，以检测样品质量及确定1．2血液总RNA抽提取适量血液，加入1mITrizol将细合适的实验条件。结果显示，HBsAg．HBeAg，PreS2卡¨(；AI胞转移至1．5mIEP室温放置5min，使其充分裂解，12000DH熔解曲线均为单一峰二分之一溶解温度略有差异，阴种基r／rain离心5min，上清转移至另一EP管，弃沉淀。按200

7、I因均无杂信号出现，而且据扩增曲线得知日的基因都_口I以达到氯仿(三氯甲烷)／mIFrizol加入氯仿，震荡混匀室温放置15平台期见图l(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。min，12000×g离心15min，吸取上层水相至另一EP管中，按2．2荧光定量PCR检测HBsAg，HBeAg，PreS2基的表0．5mL异丙醇／mITrizol加入异丙醇混匀，l2000×g离心从分析结果可以看出，乙肝患者血清中HBsAg，HBeAg，10rain，弃上清，RNA沉于管底。加入75乙醇，4C、PreS2的ct值均值分别为25．

8、57±3．65，27．74±3．94和8000×g离心5min，尽量弃上清，室温晾干或真空干燥5～1023．56±3．54，阴性对照组血清中的HBsAg，HBeAg，PreS2的min。加入RNasefreewater201，取出1I准备做电泳鉴Ct值分别为3O