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《ASON对急性早幼粒白血病细胞株HL60VCR多药耐药的逆转.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、放射免疫学杂志2005年第18卷第3期JofRadioimmunology2005,18(3)—221—·论著·ASON对急性早幼粒白血病细胞株HL60/VCR多药耐药的逆转作用南京医科大学附属南京第一医院临床核医学中心(210006)瞿卫王自正王书奎立彦摘要目的:探讨反义寡核苷酸(ASON)对耐长春新碱的急性早幼粒白血病细胞(HL60/VCR)多药耐药(mdr1)的逆转效果。方法:以HL60/VCR细胞为模型,合成正、反义寡核苷酸作用于HL60/VCR细胞,采用RT-PCR方法、流式细胞术及药敏试
2、验等观察细胞mdr-1mRNA表达、mdr-1基因产物P-糖蛋白(P-gp)的表达和对药物长春新碱(VCR)的敏感性。结果:反义寡核苷酸处理的细胞mdr-1mRNA表达、P-gp表达较正义组及HL60/VCR细胞显著降低,且可明显提高HL60/VCR细胞株对长春新碱的敏感性。结论:反义寡核苷酸具有逆转HL60/VCR细胞多药耐药的作用。其作用机制可能是抑制mdr1mRNA的转录,使P-gp的表达受到明显抑制,提高对长春新碱的敏感性。关键词抗药性反义寡核苷酸耐长春新碱的急性早幼粒白血病细胞株Rever
3、salofMulti-DrugResistanceinHL60/VCRCellLineofAcutePromyelocyticLeukemiawithAnti-SenseOlignucleotide(ASOH)QuWei,WangZizheng,WangShukui,etal.NanjingFirstHospitalAffiliatedtoNanjingMedicalUniversity,Nanjing(210006)AbstractObjectiveToinvestigatetheefficacy
4、ofASONonreversaloftheresistanceotvincristineofHL60/VCRcelllineinvitro.MethodsHL60/VCRcelllinewascultured48hrwithASONorsenseolignucleotide(ascontrol).Theexpressionofmdr-1mRNA(withRT-PCR),Pgpexpressiononcellularmembrance(withflow-cytometry)andsensitirity
5、tovincristinewereexaminedinbothcultures.ResultsThemdr-1mRNAandPgpexpressonincelllinecalturedwithASONweresingificantlylowerthanthoseincelllineculturedwithsenseolignucleotidewhilethesensititytovincristinewasgreatlyenhanced.ConclusionASONcouldreversethemu
6、lti-drugresistanceinHL60/VCRcellline,possiblythroughsuppressionoftranscriptionofmdr-1mRNA,resultinginde2creaseofPgpexpressionwithenhancedsensitivitytovincristine.KeyWordsmultidrug,resistance,antisenseoligodeoxynucleotide,HL60/VCR[2]多药耐药(mdr)是白血病和肿瘤化疗失败
7、的主要原因,GCTCCTGA3’。硫酸长春新碱(VCR)为杭州赛诺菲民生其作用机制相当复杂。目前研究mdr-1过表达引起的多药制药有限公司产品。耐药比较多,也研究得比较清楚。传统的逆转剂都是作用在112细胞培养HL60和HL60/VCR细胞株置于含15%小P-糖蛋白(P-gp)水平,效率较低,副作用大。反义寡核苷牛血清的RPMI1640培养液中培养。约(2～3)d传代一次,酸基因治疗技术从基因水平逆转多药耐药,为mdr的逆转录取指数生长期细胞进行实验。5提供了新的策略。本文以耐长春新碱的HL60/V
8、CR细胞为113细胞耐药性试验取2×10/ml的HL60和HL60/模型,合成一段27-mer的反义寡核苷酸,观察其对多药耐VCR细胞分别接种于96孔培养板,常规培养24h,在HL60药的逆转作用。细胞中加入药物硫酸长春新碱(VCR),使VCR终浓度分别为0、015、1、2、4、8、16ng/ml,在HL60/VCR细胞中加入的1材料和方法VCR终浓度分别为0、50、100、500、1000、2000、5000ng/ml,平111材料急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL6
