人白细胞介素-15与18的协同刺激体外活化肿瘤浸润淋巴细胞的作用

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1、中华实验外科杂志2010年9月第27卷第9期ChinJExpSurg，September2010，Vo1．27，No．9·1275··实验研究·人白细胞介素一15与18的协同刺激体外活化肿瘤浸润淋巴细胞的作用陈志芬邓长生汪付兵彭艳方喜平冯茂辉谢伟陈家宽【摘要】目的观察白细胞介素(IL)一15与IL一18协同刺激活化肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的作用。方法用IL一15与IL一18共同刺激从结肠癌患者分离得到的肿瘤浸润淋巴细胞，通过测定其分泌转化生长因子(TGF)一p、IL-4、干扰素(IFN)．水平以及肿瘤浸润淋

2、巴细胞的杀伤功能，观察IL一15与IL一18活化肿瘤浸润的淋巴细胞的功能。结果IL一15与IL一18共同作用于肿瘤浸润淋巴细胞，能够抑制TGF—p、IL-4的分泌(P<0．05)，促进IFN一的分泌(P<0．05)，同时能提高肿瘤浸润淋巴细胞的杀伤活性。结论IL一15与IL—l8协同刺激能活化肿瘤浸润淋巴细胞。【关键词】IL一15；IL一18；肿瘤；淋巴细胞Synergicefectsofhumaninterleukin-15and-18onactivatationoftumor-inrdtratinglym

3、phocytes／nvitroCHENZ—fen．DENGChang—sheng．WANGFu—bin．PENGYah．FANGXi-ping．FENGMao—hu，XIEWe，C船ⅣJia—kuan．6eClinicalResearchCenterofColonD~ease，DepartmentofOncolgy，ZhongnanHospita1WuhanUniversityWuhan43oO7lChinaCorrespondingauthor：DENGChang—sheng，Email：Cs06@yaho

4、o．corn．cn【Abstract】ObjectiveToexplorethesynergicefectsofinterleukin(IL)一15andIL一18onactiva—tionoftumor．infiltratinglymphocytes(TIL)．MethodsIL一15andIL．18CO—stimulatedTILfrompatientswithcoloncancerandthefunctionofTILwasevaluatedbydetectingtransforminggrowthfa

5、ctor(TGF)一B，IL-4．IFN一andcytotoxicityofTIL．ResultsSyner~ceffectsofIL一15andIL．18couldinhibitthesecretionofTGF—BandIL-4fromTIL(P<0．05)，increasethesecretionofIFN一fromTIL(P<0．05)。meanwhilecouldenhancethecytotoxicityofTIL．ConclusionSynergiceffectsofIL一15andIL一18c

6、anactivateTIL．【KeywordslIL一15；IL一18；1、lnor；Lvmphocytes肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)在体外刺激下可向Thl细材料与方法胞分化，但其杀伤活性并没有明显提高，这说明在肿瘤微环境中有某些物质可能抑制了TIL的杀伤功能_1。J。1．一般资料：中南医院病理科2007至2008年经白细胞介素(IL)．15被认为能够加强NK细胞的杀伤活病理诊断为结肠癌的手术切除肿瘤组织标本22例，患性，同时能够调节肿瘤微环境中细胞因子的表达，者术前均未经化学治疗或放射治疗。其中男14例，女

7、IL．18被认为是继IL．12之后发现的又一种能够强烈诱8例；年龄38～73岁，平均54．9岁；TNM分期I期12导干扰素(IFN)--y分泌的细胞因子⋯，这两种细胞因子例，Ⅱ期7例，Ⅲ期3例。人细胞因子TGF．／3、IL4、单独应用，都能够增强机体的免疫功能，但对于TIL的IFN．^y酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒购自影响报道尚少。我们通过IL．15与IL一18的协同作用，eBioscience公司，细胞因子IL．15、IL．18购自R&D公观察是否能够抑制转化生长因子(TGF)．B的产生，促进司

8、，淋巴细胞分离液购自天津灏洋生物公司。人结肠TIL的杀伤功能。癌细胞SW480细胞购自武汉大学中国典型培养物保藏中心。2．夕周血淋巴细胞的制备：从每个结肠癌患者抽取10ml外周血，加入肝素抗凝，然后按照淋巴细胞分DOI：10．3760／ema．J．1sgn．1001-9030．2010．09．035离液说明书分离单个核细胞，分离的单个核细胞用基金项目：湖北省自然科学基金资助项目(2009CDB201