细胞DNA定量分析技术.doc

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1、细胞DNA定量分析技术细胞DNA定量分析技术主要通过对细胞核内DNA含量或倍体的测定来判断细胞的生理状态和病理改变,目前主要是使用全自动DNA图像分析系统(DNA-ICM),对细胞DNA进行定量分析时,具有如下特点:①检测细胞核内的相对DNA含量。23对染色体约为7.18pg,但细胞DNA定量分析技术是检测细胞核内的相对DNA含量,而不是绝对值。在细胞DNA定量分析中,常用c(content)作为单位来衡量DNA的含量。1个c为正常G0/G1细胞DNA含量的一半,故G0/G1细胞为2c细胞(2倍体细胞),而G2/细胞为4c细胞(

2、4倍体细胞)。②Feulgen染色使DNA特异性着色。Feulgen染色由Feulgen和Rossenbeck在1924年发现的一种细胞核内DNA染色技术。其染色的深浅与DNA的含量成正比。③通过测量光密度(灰阶)计算被测细胞细胞核的积分光密度值(IOD,integratedopticaldensity)。当被测细胞处于G0/G1期时,其IOD量与正常细胞IOD平均值很接近。④用DNA指数来表示DNA含量。DNA指数=被测细胞DNAIOD值/正常细胞DNAIOD平均值。常用DNA指数来表示DNA含量。当被测细胞处于G0/G1期时

3、,其IOD量与正常细胞IOD平均值很接近,故DNA指数为1,即为2c。同理,处于S期的细胞,DNA指数在1~2之间,即2c~4c之间。⑤分析每个细胞的DNA含量,并用DNA直方图,散点图显示标本恶性度。DNA定量分析能够对检测的每个细胞的DNA含量进行定量分析,且按细胞DNA含量高低,由高到低自动排序,将核酸含量高的前30个细胞核酸含量值直接报告,高于正常值为癌变细胞。对癌细胞的检测实现智能化、标准化、自动化,无需依赖病理医生的阅片,能有效弥补细胞学诊断的“三不特性”。 图1:细胞DNA倍体分析报告图

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