实验室标准操作规程SOP.doc

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1、实验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页实验室标准操作程序（SOP）版号：第一版编制：审核：批准：受控状态：发放编号：持有人：发布日期:2007年08月08日实施日期:2007年08月08日更改一览表序号更改时间更改章节号更改单号备注烟台新海水产食品有限公司2007年08月08日发布第0次修改实验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页00.目录章节标题页数01细菌总数的检验402大肠菌群、大肠杆菌的检验503金黄色葡萄球菌的检验504沙门氏菌的检验605副溶血性弧菌的检验7烟台新海水产食品有限公司200

2、7年08月08日发布第0次修改实验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页06霍乱弧菌的检验807单核细胞增生李斯特氏菌的检验908志贺氏菌的检验1009霉菌的检验1110表面样品的检验1211水的检验1301.出口食品细菌总数的检验方法1.仪器和设备1．1恒温培养箱：36±1℃1．2恒温水浴箱：45±1℃1．3高压灭菌锅1．4均质器1.5冰箱：0-4℃和-15～-20℃1．6试管:18×150mm1．7锥形瓶:500ml250ml1．8平皿：直径为90mm烟台新海水产食品有限公司2007年08月08日发布第0次修改实

3、验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页1．9灭菌吸管1．10灭菌均质杯1．11酒精棉1．12天平:感量0.1g2．培养基的制备2.1生理盐水:称氯化钠8.5g溶于1000.0ml蒸馏水中,分装锥形瓶和试管内,每管吸9ml，121℃高压灭菌。2.2平板计数琼脂称平板计数琼脂23.5g加入1000.0ml蒸馏水中，煮沸溶解，分装锥形瓶内，121℃高压灭菌。3.操作程序3.1样品稀释以无菌操作取25g样品放入装有225ml生理盐水的灭菌均质杯内，均质1分30秒，制成1：10的样品匀液用灭菌吸管吸取1ml样液放入9ml生理

4、盐水中，摇匀。从试管中吸取1ml样液分别注入两个平皿内，制成10倍的样品稀释液，依次类推（10-2、10-3）平板计数琼脂（恒温45±1℃）分别倒12-15ml平板计数琼脂入各平皿待琼脂凝固后将平皿翻转立即将平皿内的样液和琼脂充分混合将平皿旋转，注意倾注时间不宜太长立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h3.2培养4.计算如下表（备注：25-250个菌落为合适范围，菌落成链状明显的计为一个菌落，不明显的不计数，平皿边缘和琼脂表面成水膜样菌落或生长过量的，即报告为蔓延菌落。）样品号菌落数平皿菌落数1：101：1001：100

5、012381602121802.3×103个/g22362602272802.5×103个/g3180014401.6×102个/g4多不可计24523多不可计278202.6×104个/g烟台新海水产食品有限公司2007年08月08日发布第0次修改实验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页5000000＜10个/g6多不可计25521多不可计225402.7×104个/g7多不可计21018多不可计240282.3×104个/g8多不可计26030多不可计230282.7×104个/g9多不可计多不可计523多不可

6、计多不可计4875.1×105个/g10多不可计24535多不可计230蔓延菌落2.9×104个/g02.出口食品大肠菌群和大肠杆菌的检验方法1．仪器和设备1．1恒温培养箱：36±1℃1．2恒温水浴箱：44.5±1℃1．3高压灭菌锅1．4均质器1．5试管:18×150mm、18×180mm1．6锥形瓶:500ml250ml1．7平皿：直径为90mm1．8灭菌均质杯1．9灭菌吸管烟台新海水产食品有限公司2007年08月08日发布第0次修改实验室标准操作程序XH2-019-01第30页共30页1．10酒精棉1．11天平：感量0.1g

7、1.12冰箱：0-4℃和-15～-20℃1.13显微镜2．培养基的制备2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤称35.6g溶于1000.0ml蒸馏水中，加热煮沸充分溶解，分装于有倒立的小发酵管的18×180mm试管中，每管10ml，于121℃高压灭菌15min。2.2煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）称40g溶于1000.0ml蒸馏水中，加热煮沸充分溶解，分装于有倒立的小发酵管的18×180mm试管中，每管10ml，121℃高压灭菌15min。2.3EC肉汤称37g溶于1000.0ml蒸馏水中，加热煮沸充分溶解，分装于有倒立的小发酵管

8、的18×180mm试管中，每管吸8ml，121℃高压灭菌15min。2.4伊红美蓝琼脂（EMB）称37.5g溶于1000.0ml蒸馏水中，加热煮沸充分溶解，分装于三角烧瓶，121℃高压灭菌15min。摇匀冷却至45℃倾注平皿。2.5营养琼脂称33g溶于1000.