微生物实验室sop.doc

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1、临床微生物学检验(sop)Ⅰ高压锅使用的标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期******高压锅的使用**********年**月**日【目的】确保高压效果的可靠性。【适用范围】蒸气式高压锅。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作方法】1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。2．打开排气阀。3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。4．观察排气阀的排气情况，待排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到

2、0.05mPa时，关闭排气阀。5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在0.15mPa。电加热时，可切断电源，维持压力持续15分钟，至多不超过30分钟，否则营养物质破坏。7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅱ培养箱使用的校准标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期******培养箱使

3、用、维护与校准********年**月**日【目的】确保培养箱温度恒定。【适用范围】各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作方法】1．培养箱应放置于水平地面（或坚固的水平台），电源电压须匹配。2．从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。3．将温度调节旋扭调至所需温度，然后将电源开关拨至“开”处。4．每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计，监测实际温度。5．培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。

4、6．培养箱正面贴有温度记录表，记录每天上班和下班时温度，如温度超出正常范围，指示该温度的刻度应划上红圈，并把修正温度记录下来。7．培养箱内外应保持清洁。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅲ培养基制备的标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期******培养基的制备********年**月**日【目的】保证培养基的质量。【适用范围】使用成品培养基干粉制备各种分离培养基。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【步骤

5、】1.在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，然后放入一定量培养基干粉，补足水量，轻轻搅拌以促进溶解。2.校正pH：高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH。3.分装：液体培养基一般在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。4.质量检查[1]无菌试验：将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。[2]效果检验：按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。5.保存：液体培养基及琼脂平板须在40C保存，一

6、般不超过7天，如用塑料袋密封至多保存2周。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅳ革兰染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******革兰染色********年**月**日【目的】确保染色结果清晰可靠。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【试剂】1.结晶紫溶液A液：结晶紫2g95%乙醇20mlΒ液：草酸铵0.8g蒸馏水80ml使用前24小时将A液Β液混合后，过虑后装入试剂瓶内备用。2.碘液碘1g碘化钾2g蒸馏水3

7、00ml3.脱色液：95%乙醇4.复染液储存液：沙黄2.5g95%乙醇100ml应用液：储存液10ml蒸馏水90ml【方法】1.待检标本用无菌生理盐水涂片，经自然干燥或火焰固定。2.加结晶紫液染1分钟，清水冲去染液。3.加碘液染1分钟，清水冲去染液。4.加95%乙醇脱色液，不时摇动约10-30分钟，至紫色已脱落为至，水冲洗。5.加复染液（伊红），染30分钟，水冲洗。6.待涂片自然干燥后，油镜镜检。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅴ抗酸染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******抗酸染色

8、********年**月**日【目的】确保染色结果清晰可靠。【方法】（一）碱性复红染色法【试剂