微生物实验室sop.doc

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1、临床微生物学检验(sop)Ⅰ高压锅使用的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******高压锅的使用**********年**月**日【目的】确保高压效果的可靠性。【适用范围】蒸气式高压锅。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【操作方法】1.将水加到高压锅内至其刻度线,将欲灭菌物品放入锅内,关闭锅门,拧紧螺丝并确认已经封闭。2.打开排气阀。3.打开蒸汽开关,向锅内输入蒸汽或接通电源,使产生蒸汽。4.观察排气阀的排气情况,待排出的气体由冷气变为蒸汽,压力表达到

2、0.05mPa时,关闭排气阀。5.观察压力表,当压力升至0.15mPa时,开始计时。6.压力达0.15mPa后,可调节进气阀,减少进气量,维持压力并使其稳定在0.15mPa。电加热时,可切断电源,维持压力持续15分钟,至多不超过30分钟,否则营养物质破坏。7.关闭进气阀门或切断电源,让锅内物品自然冷却,不可马上打开排气阀,以免发生意外。8.待锅内压力降为零时,可打开锅盖,取出物品。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅱ培养箱使用的校准标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******培养箱使

3、用、维护与校准********年**月**日【目的】确保培养箱温度恒定。【适用范围】各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【操作方法】1.培养箱应放置于水平地面(或坚固的水平台),电源电压须匹配。2.从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。3.将温度调节旋扭调至所需温度,然后将电源开关拨至“开”处。4.每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计,监测实际温度。5.培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。

4、6.培养箱正面贴有温度记录表,记录每天上班和下班时温度,如温度超出正常范围,指示该温度的刻度应划上红圈,并把修正温度记录下来。7.培养箱内外应保持清洁。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅲ培养基制备的标准操作程序(SOP)实验室名称项目编号制定日期******培养基的制备********年**月**日【目的】保证培养基的质量。【适用范围】使用成品培养基干粉制备各种分离培养基。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【步骤

5、】1.在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量,然后放入一定量培养基干粉,补足水量,轻轻搅拌以促进溶解。2.校正pH:高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH。3.分装:液体培养基一般在灭菌前分装,分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。4.质量检查[1]无菌试验:将制好的培养基在350C孵育过夜,判定是否灭菌合格。[2]效果检验:按不同的培养要求,接种相应的菌种,观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征,判断培养基是否符合要求。5.保存:液体培养基及琼脂平板须在40C保存,一

6、般不超过7天,如用塑料袋密封至多保存2周。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅳ革兰染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******革兰染色********年**月**日【目的】确保染色结果清晰可靠。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【试剂】1.结晶紫溶液A液:结晶紫2g95%乙醇20mlΒ液:草酸铵0.8g蒸馏水80ml使用前24小时将A液Β液混合后,过虑后装入试剂瓶内备用。2.碘液碘1g碘化钾2g蒸馏水3

7、00ml3.脱色液:95%乙醇4.复染液储存液:沙黄2.5g95%乙醇100ml应用液:储存液10ml蒸馏水90ml【方法】1.待检标本用无菌生理盐水涂片,经自然干燥或火焰固定。2.加结晶紫液染1分钟,清水冲去染液。3.加碘液染1分钟,清水冲去染液。4.加95%乙醇脱色液,不时摇动约10-30分钟,至紫色已脱落为至,水冲洗。5.加复染液(伊红),染30分钟,水冲洗。6.待涂片自然干燥后,油镜镜检。操作人员部门主管质量负责人姓名******************日期**年**月**日Ⅴ抗酸染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期******抗酸染色

8、********年**月**日【目的】确保染色结果清晰可靠。【方法】(一)碱性复红染色法【试剂

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