甘草总黄酮的提取.doc

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1、甘草总黄酮的提取工艺研究摘要：目的：用正交法研究提取甘草中的甘草总黄酮类化合物最佳提取工艺。方法：选取乙醇浓度、提取时间、温度、料液比个主要影响因素，采用正交法，以甘草总黄酮类化合物得率作为检测指标。结果：应用酸溶碱沉法获得甘草总黄酮类化合物的最佳提取工艺是：75%的乙醇，提取2h，酸沉PH为2.5，液料比为20:1。结论：该方法提取率高，稳定性好，操作简便，适合工业化生产。关键词：甘草甘草总黄酮正交设计提取工艺甘草为双子叶植物豆科甘草，胀果甘草，或光果甘草的根及根茎。始载于《神农本草经》，列为上品。甘草性平，味甘，归十二经。有解毒、祛痰、止痛、解痉以至抗癌等药理作用。在中医上，甘草补脾

2、益气，滋咳润肺，缓急解毒，调和百药。临床应用分“生用”与“蜜炙”之别。生用主治咽喉肿痛，痛疽疮疡，胃肠道溃疡以及解药毒、食物中毒等；蜜炙主治脾胃功能减退，大便溏薄，乏力发热以及咳嗽、心悸等。甘草是我国传统常用中草药之一，也是我国重要的植物资源[1]。甘草黄酮类成分是甘草中最重要的活性成分之一，具有抗氧化、抗肿瘤、增强心血管功能、增强免疫力等作用[2-5]。因此，开展甘草的深加工，使甘草资源得以充分利用，增加资源的附加值，前景十分可观。为此，笔者以甘草为对象，研究了甘草黄酮的乙醇回流提取工艺，单因素试验确定各因素对提取工艺的影响，正交试验确定甘草黄酮提取的最佳工艺条件。1、仪器与试药1.1

3、仪器:烧杯、容量瓶、移液管、玻璃棒、量筒、回流装置、滤纸、HH24数显恒温水浴锅、分析天平、AB1042N电子天平、布氏漏斗、SHZ2C型循环水多用真空泵1.2试剂:甘草，市售;试剂:蒸馏水、氢氧化钠、盐酸2、方法与结果在利用碱溶酸沉法从甘草中获得甘草总黄酮的过程中，我们通过预试验发现影响提取得率的主要因素为乙醇浓度、提取时间、温度、料液比。故选择乙醇浓度(A)、提取时间(B)、酸沉pH值(C)、料液比(D)作为考察的四个因素，各取三个水平(见表1)，以甘草总黄酮得率(%)为考察指标。提取工艺与试验结果、方差分析和验证试验结果依次见表2、表3、和表42.1正交试验设计2.1.1正交因素水

4、平设计采用碱溶酸沉法进行提取，选择乙醇浓度、提取时间、酸沉PH值、料液比四个因素，每个因素选择三个水平，设计正交试验因素水平表(见表1)表1正交因素水平设计表Table1Orthogonaldesignfactorleveltable因素水平A乙醇浓度(%)B提取时间(h)C酸沉PH值D液料比1651.53.0152752.02.5203852.52.0252.1.2正交试验设计结果分别取药材10g，按上述L9(34)正交表方案进行试验，以最后甘草总黄酮得率为指标进行分析，结果见表2，方差分析见表3。表2正交试验设计及结果Table2Orthogonaltestdesignandresu

5、lts实验号因素结果ABCD11.00001.00001.00001.00002.3121.00002.00002.00002.00002.4131.00003.00003.00003.00002.4242.00001.00002.00003.00002.4452.00002.00003.00001.00002.5362.00003.00001.00002.00002.4573.00001.00003.00002.00002.4183.00002.00001.00003.00002.3593.00003.00002.00001.00002.36K17.14007.16007.11007.

6、2000K27.42007.29007.21007.2700K37.12007.23007.36007.2100R0.30000.13000.25000.0700SS0.01880.00280.01060.0010表3方差分析表Table3AnalysisofVarianceTable方差来源离差平方和SS自由度f均方SF值显著性PA0.01882.00000.009419.6279P<0.05B0.00282.00000.00142.9535P>0.05C0.01062.00000.005311.0465P>0.05D0.00102.00000.00051.0000P>0.052.13

7、结果分析由直观分析可知，利用水提醇沉法提取甘草总黄酮的过程中，影响提取效果的因素顺序为：乙醇浓度＞酸沉PH值＞提取时间＞液料比，以乙醇浓度影响最大，为主要因素，其它为次要因素。考虑到继续增加乙醇浓度和延长提取降低酸沉PH对结果影响较小，从工业生产节约能源、费用，省时考虑，确定利用碱溶酸沉法提取甘草总黄酮的最佳提取工艺为A2B2C2D2，即75%的乙醇，提取2h，酸沉PH为2.5，液料比为20:1。2.2工艺流程甘草药材75%乙醇加热