SBT 10315-1999 孢子数测定法.pdf

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1、备案号:2742-1999中华人民共和国行业标准SB丹i}抱子数测定法代替ZBX66028-87Enumerationofspore本方法适用于酿造酱油半成品—菌种的抱子数测定。仪器与试剂a.显微镜、血球计数板、盖片b.95写酒精、稀硫酸(1，10)c.天平:感量0.OOlg,2雄作方法2.1样品稀释:精确称取种曲或二级菌种1g(称准至0.002g)，倒入盛有玻璃珠的250mL锥形瓶内，加95%酒精5mL，加无菌水20mL，加稀硫酸lOmL，充分振摇，使分生抱子个个分散，然后用多层纱布过滤、冲洗，务使滤渣不含抱子，稀释至500

2、mLe2.2制片:取稀释液1滴，滴于血球计数板的计算格上，然后将盖片轻轻由一边向另一边压下，使盖片与计数板完全密合，液中无气泡，用滤纸吸干多余的溢出悬浮抱子液，静置数分钟，待抱子沉降。2.3观察计数:用低倍镜头或高倍镜头观察。由于稀释液中的抱子，在血球计数板上处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而计数时必须逐格调动微细螺旋，才能不使遗漏。抱子常位于大格的划线上，应一律取二边计数，而弃另二边，以减少误差。使用16X25的计数板时，只计板上四个角上的4个大格(即100个小格)。如果使用25X16的计数板，除计四个角的4

3、个大格外，还需要计中央一大格的数目(即80个小格)。每个样品重复观察计数不少于2次，然后取其平均值。即为该样品种曲的抱子数。3计算3.116X25的计数板抱子数(个/克)=揣X400X10000X答___nV，_、一4入土U’关二:二⋯‘二‘.·..⋯⋯.““二，二“.......⋯.⋯”几11吸了式中:n-10。小格内抱子总数，个;V—泡子稀释液体积，mL;国家国内贸易局1999-04-15批准1999-04-15实施226’SB厂r功肛压一1创拍G—样品重量，9。3.225X16的计数板抱子数(个/克卜品X400X1000

4、0X答一5X10'X弩·······································⋯⋯(2)式中:n-80小格内饱子总数，个;V-抱子稀释液体积，mL;G—样品重量+9。4注惫事项4.1称样要尽量防止抱子的飞扬。4.2测定时，如果发现有许多抱子结集成团或成堆，说明样品稀释未能符合操作要求，因此必须重新称重、振摇、稀释。4.3生产实践中应用时.种曲以干物质计算。因而需要同时测定种曲水分，计算时样品重量则改为绝干重量。样品绝干重量=G(1-W)”·”·”·”.，”············“··“··.，.····

5、·····”·”·”一(3)式中:G—样品重量，9;W—样品水分的百分比含量，%。附加说明:本标准由国家国内贸易局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。227