DB22T 2274-2015 金针菇中多糖的测定 苯酚-硫酸法.pdf

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1、ICS67.080B04备案号：44994-2015DB22吉林省地方标准本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2274—2015金针菇中多糖的测定苯酚-硫酸法Determinationofpolysaccharideforneedlemushroom-phenol-sulfuricacidmethod本标准仅供内部使用不得翻印2015-02-01发布2015-03-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2274—2015本标准仅供内部使用不得翻印前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本

2、标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林农业大学。本标准主要起草人：宋慧、李雨婷、王健、吴雷、郭志欣、金周雨、郭超、杨雪、王岩、张赫。本标准仅供内部使用不得翻印I本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2274—2015本标准仅供内部使用不得翻印金针菇中多糖的测定苯酚-硫酸法1范围本标准规定了金针菇中水溶性多糖含量苯酚-硫酸测定方法。本标准适用于金针菇子实体（干品、鲜品）中水溶性多糖含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用

3、于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T15674-2009食用菌中粗脂肪含量的测定NY/T1676-2008食用菌中粗多糖含量的测定3术语和定义本标准仅供内部使用不得翻印下列术语和定义适用于本文件。3.1水溶性多糖Water-solublepolysaccharide一类能够溶解或者溶胀于H2O中形成水溶液或分散体系的多糖。4原理试料经热水提取，通过透析膜透析，得到的多糖在浓硫酸作用下，先水解成单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚生成橙黄色物质，在490nm处有最大吸收，吸光度值与多糖含量呈正比。5试剂与材料除非有特殊说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规

4、定的三级水。5.1硫酸（H2SO4），ρ=1.84g/mL。5.295%乙醇（CH3CH2OH）。5.3苯酚（C6H6O），重蒸馏，将苯酚置于80℃的水浴中溶解，然后将一定量的苯酚移至蒸馏烧瓶中。放入玻璃珠数粒，于182℃蒸馏，弃去最初2min～3min蒸馏液，收集随后的蒸馏液，待冷却后备用。警告--苯酚蒸汽有腐蚀性和毒性，重蒸馏需在通风橱内进行。5.4葡萄糖（C6H12O6）标准品(CAS:50-99-7)。5.5800g/L苯酚溶液：量取80g重蒸馏苯酚（5.3）于100mL烧杯中，加水溶解，定容至100mL，于棕色磨口瓶中，4℃冰箱，贮存期为2个月。1DB22/T2274—20155.6

5、50g/L苯酚溶液：将5mL800g/L苯酚溶液（5.5）稀释为总体积80mL混合液，现用现配。5.7葡萄糖标准储备液：称取0.1000g葡萄糖于100mL烧杯中，加水溶解，定容至100mL，此溶液浓度为1.0g/L，于磨口瓶中，置4℃冰箱，贮存期为15天。本标准仅供内部使用不得翻印5.8葡萄糖标准工作液：将5mL葡萄糖标准储备液（5.7）稀释为总体积50mL混合液，现用现配；5.9透析袋：D36mm，截留分子量6000～8000Da。5.10标准筛：20目，0.9mm。6仪器设备6.1紫外-可见分光光度计，1cm比色杯。6.2分析天平，感量0.0001g。6.3离心机，转速在4000rpm以

6、上，离心管容量≥50mL。6.4超声波提取器。6.5干燥箱，RT+10℃～250℃。7试样的制备应按照GB/T15674-2009中6.2的要求进行制备。7.1干样：将试样剪成小块，于80℃干燥箱中烘至发脆后置于干燥器内冷却，立即粉碎。粉碎样品过孔径为0.9mm的筛。未能过筛的部分再次粉碎或经研磨后再过筛，直至全部样品过筛为止，过筛后本标准仅供内部使用不得翻印的样品全部混匀后装入清洁的广口瓶内密封保存，备用。7.2鲜样：将试样用手撕或刀切成小块，50℃鼓风干燥6h以上，待样品半干后逐步提高温度至80℃，烘至发脆后置于干燥器内冷却，立即粉碎。其他操作同7.1。8分析步骤8.1提取应按照NY/T1

7、676-2008中7.2的要求进行提取。称取1.0g粉碎过0.9mm孔径筛的试样（7.1或7.2），精确到0.001g，置于50mL具塞离心管内。用5mL水浸润试样，缓慢加入20mL无水乙醇，充分振摇，使混合均匀，置超声提取器中超声提取30min。提取结束后，于4000rpm/min离心10min，弃去上清液。不溶物用10mL乙醇溶液洗涤、离心。用30mL水分次将上述不溶物全部转入具塞锥形瓶中，以