苯酚-硫酸法测定黄河口沉积物中的多糖.pdf

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1、第43卷第12期2013年12月中国海洋大学学报PERIODICALOFOCEANUNIVERSITYOFCHINA43(12)：087～091Dec．，2013技术报告苯酚一硫酸法测定黄河口沉积物中的多糖+张潮1，陈友媛1’2“(中国海洋大学1．环境科学与工程学院；2．海洋环境与生态教育部重点实验室山东青岛266100)摘要：建立苯酚一硫酸法测定黄河口沉积物中的多糖，确定了最佳实验条件：最大吸收波长为487nn2，苯酚质量分数为12％，95．5％的浓硫酸用量为4mL，溶液反应体积为2．5mL，绘制标准曲线所采用的

2、标准物质为含有0．1g沉积物空白样品和一定量葡萄糖的混合物。结果表明，在优化实验条件下，成功获得多糖与葡萄糖之间的换算因子为4．85。该方法的精密度为4．4％，平均回收率为98．68％，相对标准偏差为2．3％。应用本方法测出黄河口沉积物中的多糖平均含量为0．1％，相对标准偏差为2．8％，与有关文献报道相符合，表明该方法能够满足黄河口沉积物中多糖含量测定的要求。关键词：苯酚一硫酸法；沉积物；多糖中图法分类号：X55文献标志码：A文章编号：1672—5174(2013)12-087—05有机质是土体的基本化学成分之一，

3、增加有机质含量可以提高土体的蓄水能力，降低土体的堆积密度，进而影响土体的稳定性[1]。多糖作为一种有机质，在非腐殖质类物质中含量较高，一些研究表明，多糖对于团聚体的形成及稳定性具有重要的影响[2]，而团聚体是土体的基本结构单元，长久以来被作为判定土体结构稳定性的指标[31；且由多糖水解的单糖诸如树胶醛糖(阿拉伯糖)有助于细菌的细胞团聚，脱氧糖则有助于絮凝[引，因此研究多糖对于深入了解有机质对沉积物稳定性影响的机理具有重要的意义。多糖的测定方法主要有苯酚一硫酸法、蒽酮一硫酸法、3，5一二硝基水杨酸(DNS)法、色谱法

4、等[s]，这些方法主要应用于医药、食品等领域。其中色谱法可对多糖进行成分分析，但操作繁琐，成本偏高；DNS法属半微量定糖法，适用于多糖含量较高物质的批量测定E63；蒽酮一硫酸法和苯酚一硫酸法是测定多糖最常用的2种方法，但前者稳定性较后者差[7]。而对于沉积物中多糖的测定，由于沉积物在结构和性质方面与食品、医药相差甚远，且其中所含多糖种类繁多，来源广泛，在有机质中的比例较低E8I，这给沉积物中多糖的测定造成一定的困难。鉴于沉积物的特殊性质和多糖对沉积物稳定性影响的研究刚刚起步，目前关于测定沉积物中多糖的方法鲜有报道，

5、故拟建立苯酚一硫酸法来测定黄河口沉积物中的多糖，通过选择优化，确定该方法运用在沉积物领域的最佳条件，为沉积物中多糖含量的测定，确定一种简便可行、精度较高，重现性好的方法。1实验部分1．1实验原理苯酚一硫酸法是测定多糖常用的一种方法，基本原理为先采用水提醇沉法提取沉积物中的多糖，除去其中单糖、双糖、低聚糖、甙类等成分，得粗多糖。然后用三氟三氯乙烷除去粗多糖中的氨基酸及醇溶蛋白等干扰成分，得精制多糖。利用多糖在浓硫酸的作用下被水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成有色化合物的特性，通过比色法求出多糖与葡萄

6、糖之间的换算因子，根据沉积物的吸光度及葡萄糖的标准曲线确定沉积物中的多糖含量。沉积物与食品和药物相比，特殊性主要表现在沉积物中存在不同粒径的难溶性颗粒物，这些颗粒物会对苯酚、浓硫酸的加入量等实验条件及吸光度产生一定的影响。大粒径的颗粒物可通过离心沉淀法予以去除，而黏粒级以下的颗粒物不可避免的会存在于被测溶液中，影响吸光度的测定。为避免颗粒物对实验结果产生影响，实验测定均在加入0．1g沉积物空白样品(具体定义见1．5)的基础上进行，通过计算被测样品与只加入0．1g沉积物空白样品的差值来确定被测样品的吸光度，即净吸光度

7、。1．2仪器和材料TU一1810紫外可见分光光度计(普析通用)；TDL-5一A台式离心机(上海安亭科学)；ELl04电子天平(梅*基金项目：国家水体污染控制与治理科技重大专项(2009X07106—003)资助收稿日期：2012—11—28；修订日期：2013一01—14作者简介：张潮(1988)，男，硕士生，主要研究方向：海洋沉积环境。E-mail：llyz—c3911@163．com**通讯作者：E-mail：youyuan@OUC．edu．cn中国海洋大学学报特勒一托利多)；DHC-9241电热恒温干燥箱(上

8、海精密)；HQ40d电导率仪(美国哈希)；KQ-250E超声波清洗器(昆山超声仪器)；玻璃仪器若干。葡萄糖、苯酚、无水乙醇，均为分析纯；95．5％浓硫酸。1mg／mL葡萄糖标准溶液：将0．1g葡萄糖溶于80mL蒸馏水中，定容至100mL。5％的苯酚溶液：称取25g苯酚溶于475mL蒸馏水中，用前摇匀。1．3样品采集与预处理于2012年3月在黄河三角洲海港区域