欢迎来到天天文库
浏览记录
ID：52541605
大小：273.50 KB
页数：8页
时间：2020-04-09
《实验五 过氧化物酶酶活性的测定.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在PPT专区-天天文库。
1、实验五 过氧化物酶活性的测定——愈创木酚比色法一、实验目的熟悉测定过氧化物酶活性的常用方法及其测定原理。二、实验原理RH2+H2O2→2H2O+R在有过氧化氢存在的条件下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，该物质在470nm处有最大吸收，可用分光光度计测量470nm处的吸光度变化速率来测定过氧化物酶活性。三、实验材料菠菜、油菜四、仪器用品与试剂分光光度计，研钵，移液管，吸管。愈创木酚，30％过氧化氢，磷酸缓冲液，反应混合液。五、实验步骤1、称取植物材料各0.5g，剪碎，放入研钵中，加入5ml磷酸缓冲液研磨成匀浆，以4000rpm离心15min，上
2、清液即为粗酶液。2、取1ml酶液，用磷酸缓冲液定容至25ml。3、取稀释液1mL，加入反应混合液3mL，立即于470nm处测定吸光度（OD）值，每隔1min读数一次。试管号反应混合物磷酸缓冲液酶液1min2min3min4min13ml1ml——————————23ml——1ml（菠菜）33ml——1ml（油菜）六、实验结果式中：ΔA470——反应时间内OD变化值。VT——提取酶液总体积（mL）。W ——植物鲜重（g）。t ——反应时间（min）。过氧化物酶活性=ΔA470×VTW×t七、思考题说明植物过氧化物酶在植物代谢中的意义。
此文档下载收益归作者所有
