藤茶提取物中二氢杨梅素的化学纯化方法研究.pdf

《藤茶提取物中二氢杨梅素的化学纯化方法研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第44卷第1期2014年1月中国海洋大学学报PERIODICALOFOCEANUNIVERSITYOFCHINA44(1)：071～074Jan．，2014研究简报藤茶提取物中二氢杨梅素的化学纯化方法研究。刘涛，张晓敏，郑红艳，万升标”(中国海洋大学医药学院，山东青岛266003)摘要：藤茶粗提物含有二氢杨梅素和杨梅素等黄酮类化合物，其中以二氢杨梅素的含量最高。为从藤茶粗提物中分离得到纯的二氢杨梅素，本文选择用碘甲烷对藤茶提取物进行甲基化，柱色谱分离纯化得到五甲基化二氢杨梅素。用三溴化硼脱去甲基，得到纯的二氢杨梅素，产率为12．2％。二氢杨梅素结构经熔点、核磁共振氢谱、碳谱和

2、质谱确认。关键词：二氢杨梅素；甲基化；纯化中图法分类号：P731文献标志码：A文章编号：1672—5174(2014)01—071—04二氢杨梅素(3，5，7，3’，4’，5L六羟基一2，3一双氢黄酮醇，Dihydromyricenin)广泛存在于葡萄科蛇葡萄属植物中[1]，尤其在显齿蛇葡萄植物的幼嫩茎叶中含量更高[2]。药理研究表明，二氢杨梅素具有消炎、抑菌、止咳、阵痛、消脂[3]及抗脂质、保肝护肝、抗高血压、抗肿瘤、清除自由基、增强人体免疫力等[4]功效。文献报道对二氢杨梅素进行衍生化亦能发现更好的活性化合物。Matsumoto等发现甲基化的二氢杨梅素对纽一dospori

3、um真菌抑菌能力是二氢杨梅素的4倍[5]；二氢杨梅素乙酸酯、硬脂酸酯和月桂酸酯具有较好的抗氧化作用[6书1；5一氟尿嘧啶乙酸与二氢杨梅素酯化衍生物对K562和K562／ADR肿瘤细胞有较强的抑制作用[9]。随着二氢杨梅素生物活性研究和衍生化越来越受到重视，高纯度的二氢杨梅素需求增加，而市售分析纯二氢杨梅素价格昂贵。因二氢杨梅素有2个手性碳，故全合成方法较复杂。从天然植物中提取纯化二氢杨梅素是简单经济的方法。国内外有部分研究报道利用有机溶剂提取法和大孔吸附树脂提取法Do-n]从藤茶提取物中提取得到二氢杨梅素。而关于二氢杨梅素纯化方面的研究则较少。有报道用重结晶法和层析分离法[1

4、2]制备高纯度二氢杨梅素。层析技术分为吸附树脂和高效液相制备技术等。高效液相色谱及高效逆流色谱分离法单次分离的样品量少，而重结晶法存在试剂消耗大且收率低的缺点，因此这两种方法均不合适工业化生产。目前，尚未有大规模工业生产高纯度二氢杨梅素的报道。为确定二氢杨梅素提纯工艺以及藤茶提取物中组分，本文结合实验室前期表没食子儿茶素没食子酸酯的化学精制方法‘13]，以及二氢杨梅素多酚羟基保护基脱除难易程度设计了甲基化一去甲基化和乙酰化一去乙酰化两条纯化路线，运用甲基化一去甲基化方法以较高产率制备了二氢杨梅素，并确定了藤茶提取物中主要成分构成。1实验部分1．1仪器与试剂藤茶提取物(二氢杨梅

5、素纯度为90％，陕西杨凌东科麦迪森制药有限公司)；二氢杨梅素对照品(含量>99％，Alfa公司)，其余试剂均为市售分析纯产品，除特别说明外，不经处理直接使用。WRX一1S型显微熔点仪(温度计未经校正)；JEOLJNM—EPC600核磁共振光谱仪(内标为TMS)测1H，13CNMR；Q-TOFUhimaTMGLOBAL质谱仪。1．2化合物的制备1．2．12-(37，47，57一三甲氧基)一3一羟基一5，7一二甲氧基一色稀一4一酮(1)在500mL反应瓶中加入DMF(100mL)、藤茶提取物(12g)及碳酸钾(30g)，搅拌0．5h，冰盐浴条件下恒压滴加碘甲烷(12mL，0．19

6、m01)，0。C反应2h后室温反应22h。经薄层色谱检测反应完全后，在搅拌下将反应液倒入400mL冰水中，二氯甲烷(3×100mL)萃取，收集有机相，饱和食盐水(3×100mL)洗3次，蒸馏水(3×100mL)洗3次，无水硫酸镁干燥，旋转蒸发除去溶剂，得到咖啡色固体。硅胶柱层析(V乙酸乙酯：％油醚一1：2)得到化合物1，产率为17．2％。mp：232～234。C；1HNMR(CDCl3，600MHz)艿(ppm)：7．48(S，2H)，6．54(d，J一2．2Hz，*基金项目：国家自然科学基金项目(81172926)；国家大学生创新性实验计划项目(1111010803)资助收

7、稿日期：2012—12—04；修订日期：2013—05—10作者简介：刘涛(1987一)，男，硕士生。Email：confidenceliutao@163．corn*÷通讯作者：E-mail：biaowan@OUC．edu．cn72中国海洋大学学报1H)，6．36(d，J一2．2Hz，1H)，3．98～3．92(4s，15H)；13CNMR(CDCl3，150MHz)占：172．1，164．6，160．7，158．9，153．3，141．8，139．6，138．1，126．4，／、曼／7／Crudeex