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时间:2020-03-27
《如何正确设计技术路线、实施方案.docx》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、如何正确设计从生物样品中分离纯化生物大分子的技术路线和正确实施设计方案一、通用的技术路线设计方案:1、确定要分离提纯的生物大分子的目的和要求不论是学生学习简单的分离提纯方法,还是科研人员进行研究、开发或者探索新物质,一个明确的目的和要求都是必不可少的。本课题要求对生物大分子进行分离提纯,也即在了解生物大分子(即蛋白质、核酸、脂质、糖类)的前提下,进行尽可能完善的提纯,同时也应注意满足现实设备情况。2、建立相应可靠的分析测定方法分离提纯最为重要的就是最终的“纯度”,所以一套完善可靠地分析测定方法就是进行工作的前提条件。没有这双“眼睛”,将无法得到最终的实验结果。3、查阅文献调研和预备性实验要进
2、行分离提纯就必须掌握四种生物大分子的一般理化性质以及需要提纯的产物的一些特殊理化性质,只有这样才能进行分离提纯的工作。4、生物材料的破碎和处理需要分离的生物大分子往往贮存在生物体内,而根据生物种类的不同,如微生物、动物、植物等,有不同的生物材料处理方式,而处理方式的得当与否,往往也决定着最终的提取率的高低甚至实验的可行性。5、分离纯化方案的选择和探索同样的一类物质往往有很多种方案可以进行分离提纯,但如何根据所需生物大分子的种类、它所处的生物环境、客观因素等种种条件来选择最好的一种分离纯化方式,是整个实验最为困难的步骤。而在一些尖端领域,甚至需要研究人员自行探索新的方案,这无疑又大大加大了这一
3、步的难度。所以可以说,这一步是整个实验过程中最为困难的一步,也应是投入精力最多、选择最仔细的一步。6、生物大分子纯度的检测根据提纯的生物大分子种类不同,选用相应的检测方式进行检测。7、产物的浓缩、干燥与保存二、常用的检测方法:1、物理、化学方法:比色法、气相/液相色谱法、光谱法(紫外/可见、红外和荧光等分光光度法)、电泳法、以及核磁共振等。但应注意,必须同时采用2~3种不同的纯度鉴定法才能确定。2、生物学的测定法:酶活测定、蛋白质含量测定、免疫化学方法、放射性同位素示踪法等;三、要了解的主要理化性质:1、在水和各种有机溶剂中的溶解性。2、在不同温度、pH值和各种缓冲液中蛋白质大分子的稳定性。
4、3、态时对温度、含水量和冻干时的稳定性。4、物理性质:分子的大小、穿膜的能力、带电的情况、在电场中的行为、离心沉降的表现、在各种凝胶、树脂等填料中的分配系数等。5、化学性质:对各种蛋白酶、水解酶的稳定性和对各种化学试剂的稳定性。6、对其他生物分子的特殊亲和力等。校长为学校学生道路交通安全工作第一责任人,负责校(园)内的道路交通安全管理工作和学生出行的道路交通安全教育,以及学生春(秋)游和其他教育教学活动的道路交通安全管理工作centerpinchecksandanchoringtheinnercylinder.AccordingtoWhilecouplingalignmentshouldke
5、epoiloutofcavityandlocatetherotoraxisneckraisedarewithintheprescribedlimits,thereshouldbenogaps,Horn,HornandHorn0.05mmfeelergaugesfitinto.Centercoupling,condenserwaterfillingandwater-filledaccordingtofactoryrequirement.ForcouplingthreesupportedrotorCenter,themouthunderthecouplingbetweenthevalueshou
6、ldbeasstipulatedinthemanufacturer,usually0.15~0.25mm.Inthecaseofcouplingconnection,ifpossible,liftingonlyonebearingendofthesupportbearingoftherotor,removethebearing,fittedwithspecialtilesandspecialliftingtools,discrotors,checkthejournalfluttertile,shouldgenerallybelessthan0.10MM.Whenthecouplingsand
7、rotorcomeswhenthereisaconflict,thecouplingCentreshallprevail.6.4.5.2.2shaftlookingfor:...6.4.5.3.Provisionalboltconfirmedthepositioningoftherotorsize,aswellasthecouplingbetweentheadjustmentshimthicknessaccu
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