猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP1、NSP2和NSP4免疫抑制研究.pdf

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1、STUDIESoNIMMUNoSUPPRESSIONOFNoNSTRUCTURALPROTEIN1、2AND4OFPoRCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEⅥRUSZhouYefeiAThesisSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementforthePhilosophyDegreeofAgronomyCompletedinDec，2011CommencementinDec，2011原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下

2、，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者。需亲笔，签名彳净毋1年阳(1日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密r"l，在——年解密后适用本授权书

3、。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“妒’)洲僦嵫：彩扣f／年肛月／罗日I，oH伽i悔，≯具1B目录目录摘!要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．I第一章PRRSV及PRRSV结构蛋白研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。l1．1PRRS及宿主对PRRSV免疫应答⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．2PRRSV结构蛋白及其对宿主反应调节作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21．2．1GP2⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31．2．2GP3⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．i⋯．．31．2．3GP4⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．2．4GP5⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．2．5M蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61．2．6N蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一6结语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．6第二章PRRSV非结构蛋白研究进展⋯⋯⋯．2．1．PRRS

5、V非结构蛋白调节宿主免疫反应功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．1．1．Pl汛SVNSP调节体液免疫应答反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．2PRRSV细胞质蛋白质对固有免疫调节作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2．1多功能PRRSVNSP2在不同水平上调节宿主免疫反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．2．2NSPl1免疫调节作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．3PRRSV非结构蛋白在疫苗和诊断技术发展中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．3．1PRRSVNSP2的遗传标记对重组标记疫苗的启示⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132-3．2确定PRRSV毒力因子对发展PRRS疫苗

6、的重要性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．3．3PRRSVNSPs作为潜在的诊断指标⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．4PRRSV非结构蛋白1(NSPl)研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．4．1NSPl作为干扰素反应调节器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16参考文献⋯⋯⋯⋯第三章猪繁殖与呼吸综合征病毒NSPl、NSP2(1-484)和NSP4原核表达与免疫特性鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4l1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．421．1病毒、细胞及其它材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯．．421．2引物的设计与合成：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．421．3NSPl、NSP2(1-484)、NSP4基因PCR扩增及纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSPl、NSP2和NSP4免疫抑制研究1．4NSPl、NSP2(1-484)、NSP4原核表达重组质粒的构建、表达及重组蛋白的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．