影响绵羊卵母细胞玻璃化冷冻效果的因素研究.pdf

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1、分类号：密级：S814．8单位代码：学号：10086影响绵羊卵母细胞玻璃化冷冻效果的因素研究StudyonthefactorsaffectingtheefficiencyofvitrifiedoocyteslnSneeD●学位申请人：指导教!J币：学科专业：学位类别：授予单位：答辩日期：莫显红李俊杰副教授动物遗传育种与繁殖农学硕士河北农业大学二。一一年六月一日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

2、经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北壅业大堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：囊凄乒签字日期：Ⅵ，，年∥月厂日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑皇垦盔些盘鲎有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑童堡盔些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论

3、文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：蕨堕仁签字日期：沁，，年纩月／日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师躲韵袋、签字日期：矽，，年／月≥日电话：邮编：试验所“十一五”2008BAD2BlO)子究重点项目(项目摘要卵母细胞玻璃化冷冻保存对于珍稀和濒危种质资源保存、“卵子库”的建立、胚胎生物技术的发展具有重要意义。本实验以绵羊卵母细胞为研究模型，通过比较卵母细胞不同发育阶段、卵丘细胞有无及冷冻前用紫杉醇及细胞松弛素B预处理对绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存效果的影响，并对解冻后卵母

4、细胞进行体外受精、孤雌激活，结果表明：(1)体外成熟24h绵羊卵母细胞(MIIstage)与未成熟卵母细胞(GVstage)相比，玻璃化冷冻．解冻后FAD染色存活率为(70．63％谘．58．51％)；体外受精卵裂率(38．42％倦．22．68％)，囊胚率(5．89％Ⅷ．O)具有显著性差异(氏O．05)。表明：成熟的绵羊卵母细胞更适宜冷冻保存。(2)卵丘细胞的有无对玻璃化冷冻MII期卵母细胞解冻后存活率、卵裂率、囊胚率均无显著性差异(尸>O．05)。(3)采用浓度为0．5gmol／L紫杉醇预处理绵羊卵母细胞冷

5、冻保存效果最佳，解冻后卵母细胞的存活率(82．38％)与其他三个实验组相比有显著差异性(尸

6、50％谘．68．87％)无显著性差异，体外受精卵裂率及桑囊胚率和孤雌激活卵裂率及桑囊胚率两组之间亦无显著性差异(尸>0．05)，但均显著低于对照组(尸

7、MoXianhongMajor：AnimalGeneticsBreedingandReproductionSupervisor：AssociateprofessorLiJunjieAbstractOocytevitrificationisofgreatsignificanceforrareandendangeredanimalgermplasmconservation，’’eggbank”established，andthedevelopmentofembryonicbiotechnology．Inthis

8、study,wetakeovineoocytesastheresearchmodeltostudytheeffectsofdifferentdevelopmentalstagesofoocytes，withorwithoutcumuluscellsandpre-treatmentwithTaxolandCytochalasinBonthecryopreservatione伍ciencyofovineoocytes