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1、玻璃化冷冻对猪卵母细胞超微结构的影响第24堂颦.2期上海交通大学(农业科学版)Vo1.24No.22006年4月JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYfAGRICULTURALSCIENCE)Apr.2006文章编号:1671-9964(2006)02.0121.06玻璃化冷冻对猪卵母细胞超微结构的影响朱淑文,张菁,华修国,朱秀萍,唐峰,徐动(上海交通大学农业与生物学院.上海201101)摘要:猪体外成熟培养的卵母细胞用平皿.微滴法玻璃化冷冻,冷冻解冻后对其超微结构损伤和正常的体外成熟培养的卵母细胞进行了电镜观察比
2、较.结果表明,玻璃化冷冻的卵母细胞解冻后有不同程度的结构损伤.包括:透明带破裂;微绒毛几乎消失;有的部位质膜模糊甚至破裂;质膜下皮质颗粒减少;线粒体膨胀,电子致密度下降,嵴消失;大量囊泡在质膜周围变形融合;细胞基质出现空白区.玻璃化冷冻引起卵母细胞结构损伤是导致卵母细胞解冻后存活力下降和受精率降低的主要原因.关键词:卵母细胞;平皿-微滴法玻璃化冷冻;超微结构;猪中图分类号:$828.34文献标识碣:AUltrastructuralChangesinPorcineOocytesCryopreservedbyVitrificationZHUShu—w
3、en,ZHANG.矗HUAXiu-guo,ZHUXiu-ping,TANG忍晦XUDong(SchoolofAgriculttlreandBiology,ShanghaiJiaotongUniv.,Shanghai201101,China)Abstract:Followinginvitromaturation.porcineoocyteswet℃cryopreservedbydish-micmdmpme~odvitrification.Theporcineoocyteswerevitrified,themorphol0calynormalrate
4、WBB39.94%,thecleavagerate(21.67%)andblastoeystrate(7.69%)wassignificantlylowerthancontrolgroupCP<O.05).Theuhrastructureofvitrifiedoocyteswasassessedbytransmissionelectron血一cmscopy(TEM)andcomparedwiththatofuntreatedcontroloocytesinordertodeterminethevariouskindsofultrastruc
5、tmaldam-ageduetovitrification.Vitrificationinducedsomeultrastructuralchanges.suchaszonapellucidacrack;thedisappearanceofal-mostallthemicmvilli;invagination,indistinctionandevenraptureoftheoolemma;fewercorticalgranulesintheooplasm;theswellingofmitochondriatogetherwithreducedma
6、trixdensityanddisappearanceofcristae;thevesiclesmigratedperipherallyintheooplasm.becameCOl1nuent;disorganizationofthematrix.Keywords:ooeyte;dish-rnicmdropme山od;vitrification:ultrastmcture;pomine随着动物胚胎工程技术的迅速发展.卵母细胞的需求量急剧增加.卵母细胞冷冻保存技术可充分利用各种动物卵母细胞资源,为细胞核移植,转基因动物等提供丰富而方便的材料来源,使
7、这些高新技术不受时问,地域限制,随时随地进行,从而为其走向实用化,商业化发展开辟道路.玻璃化冷冻是一种不需要昂贵的仪器设备.简便快速的冷冻方法.成为低温生物学领域的研究热点之一.高浓度的玻璃化冷冻液对卵母细胞的化学毒害作用较大.冷冻解冻后卵母细胞的发育潜力明显受损.因此,冷冻液含量的多少对解冻后卵母细胞的发育至关重要.王果等,】利用平皿玻璃化冷冻小鼠卵母细胞获得成功.由于猪卵母细胞与其他家畜相比对低温的耐受性差,这给猪卵母细胞的冷冻造成了很大的困难闭.关于猪卵母细胞冷冻保存研究尚处于探索阶段,特别是玻璃化冷冻对猪卵母细胞的超微结构的影响等方面收稿
8、日期#2005.08.05基金项目:上海市科委国际交流项目(015407005)作者简介:朱淑3C(1960.).女,山东龙口市人,副教
