牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究

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1、新疆农业大学硕士学位论文牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究姓名：郭娟申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：王志琴;黄俊成20090601牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究摘要本论文主要探索了牛第二次减数分裂中期(MII期)卵母细胞和生发泡期(GV期)卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法，研究结果如下：分别用玻璃微细管(GMP)法和固体表面玻璃化(SSV)法冷冻保存牛MII期卵母细胞，结果表明，SSV法(32．6％)略优于GMP法(27．1％)，但经统计分析显示，GMP法(27．1％)与SSV法(32．6％)的卵

2、裂率差异不显著(P>O．05)，两种冷冻方法与未经冷冻保存的对照组(57．9％)存在极显著差异(PO．05)，但冷冻组与未经冷冻保存的对照组显著极差异(0．6％，2．7％和23．2％，22．7％，P

3、01)。不同浓度细胞松弛素B(CB)预处理对牛体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力的影响，结果表明：存活率上，各浓度CB处理组与对照组没有显著差异(P>O．05)；激活后卵裂率上，20肛g／mlCB处理组显著高于对照组(47．67％和30．25％，P

4、卵母细胞玻璃化冷冻效果的改善。不同浓度细胞松弛素B预处理牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻的影响，结果表明：玻璃化冷冻后，CB处理组和未处理组之间卵母细胞成熟率差异不显著(尸如．05)，但均显著低于体外培养组。说明试验中所用浓度CB(2．5、7．5、15、20和30．g／IIll)对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的改善作用不明显。关键词：玻璃化冷冻；细胞松弛素B；牛；卵母细胞StudyonVitrificationofBovineOocytesAbstractTheobj．ectiveofthisthesis

5、wastoinvestigatethevitrificationofbovineoocytesinmaiosismetaphaseII(MIDorgermialvesicle(GV)stage．Theresultswereshownasfollows：BovineMIIoocyteswerevitrifiedbyGlassMicropipette(GMP)methodandsolidsurfacevitrification(ssv)method．111ecleavagedevelopmentrated

6、idnothavesignificantlydifferentbetweenGMPmethod(27．1％)andSSVmethod(32．6％)妒>O．05)，butSSVmethod(32．6％)wasbetterthanGMPmethod(27．1％)．Thereweresignificantdifferencesbetweentreatedgroupsandcontrolgroup(P<0．01)．BovineMIIoocytesintreatedandcontrolgroupswerecul

7、turedbyIVFmethodandparthenogeneticmethod．TheblastocystdevelopmentratesdidnothavesignificantlydifferentbetweenSSV+IVFgroup(0．6％)andSSV+parthenogeneticgroup(2．7％)妒>0．05)，butSSV+parthenogeneticgroup(2．7％)WasbetterthanSSV+IVFgroup(0．6％)．Thereweresignificant

8、differencesbetweentreatedgroupsandcontrolgroups(0．6％，2．7％VS23．2％，22．7％，respectively,P<0．01)．Differerntconcentrationsofcytochalasin—B(CB)onthedevelopmentofbovinematuredoocytesfollowingSSVwereexamined．Theseresultsdemonstratedthat：n