凹叶厚朴叶片蛋白提取及双向电泳体系的优化.pdf

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1、北方农业学报2017，４5（2）：11～16JOURNALOFNORTHERNAGRICULTUREdoi:10.3969/j.issn.2096-1197.2017.02.03凹叶厚朴叶片蛋白提取及双向电泳体系的优化1，321，4111陈剑成，沈少炎，蔡月琴，杨德明，陈思凯，万娟，121，2，33徐雯，何天友，郑郁善，陈礼光（1.福建农林大学林学院，福建福州350002；2.福建农林大学艺术园林学院，福建福州350002；3.福建中药材GAP工程技术研究中心，福建福州350002；4.福建闽南师范大学生物科学与技术学院，福建漳州363000）摘要

2、：为建立一套适于凹叶厚朴幼叶的双向电泳（2-DE）体系，以凹叶厚朴幼叶为材料，对蛋白提取方法、上样量、聚焦程序优化，试验结果表明，TCA/丙酮+Tris-酚法提取蛋白干粉最佳，具有产量高、污染低、背景浅特点；选用17cmpH5~8NLIPG预制胶条、15μg上样量、聚焦程序Ⅱ的2-DE电泳为最适凹叶厚朴蛋白双向电泳体系。该体系为后续凹叶厚朴分子机理研究奠定基础。关键词：凹叶厚朴；叶片；条件优化；蛋白质组；双向电泳（2-DE）中图分类号：S567.11文献标识码：A文章编号：2096-1197（2017）０2－００11－０6Totalproteine

3、xtractionandoptimizationof2-DEsystemfromtheleafproteomeofMagnoliaofficinalis1，321，411112CHENJiancheng，SHENShaoyan，CAIYueqin，YANGDeming，CHENSikai，WANJuan，XUWen，HETianyou，1，2，31，3ZHENGYushan，CHENLiguang（1.CollegeofForestry，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，Chin

4、a；2.CollegeofArtCollege，LandscapeArchitecture，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China；3.FujianGAPEngineeringResearchCenterofChineseMedicinalCrops，Fuzhou350002，China；4.CollegeofBiologicalSciencesandTechnology，MinnanNormalUniversity，Zhangzhou363000，China）Abstra

5、ct：Thepurposeofthisstudyistoestablishansuitabletwo-dimensionalelectrophoresis（2-DE）forMagnoliaofficinalisleafprotein.Thefreshleafswerechosenandgrindedintheexperimentoftwo-dimensionalgelelectrophoresis.TheresultsshowedTCA/acetone+Trissaturatedphenolmethodwithclearbackgroundinte

6、nsity，highresolutionandpurityinthecontentofseparationprotein.Inconsiderationoftheoptimizedsystemthroughselectionofseparatingtheproteinsofleaveswith17cmpH5-8NLIPGstripsandIEFⅡand2-DEprogram.ItprovidedthereferenceforresearchprogressinproteomicsofspeciesMagnoliaofficinalis.Keywor

7、ds：Magnoliaofficinalis；Leaves；Conditionoptimization；Proteome；Two-dimensionalgelelectrophoresis（2-DE）厚朴是木兰科木兰属植物，树皮厚，叶大浓荫，用，具有重要科研价值和社会价值。现已在四川、湖花大美丽，其树皮、根皮、花、种子及芽皆可入药，厚北、浙江、福建等主产区建立厚朴药材生产基地，大朴具有重要的经济价值、观赏价值。由于它生长快，力发展种植凹叶厚朴，市场前景广阔。随着测序时代产量高的特点，在医药、生产等方面都有广泛的应的到来，蛋白组学在植物研究中有了广泛

8、的应用［1］，收稿日期：2017-02-28基金项目：国家科技支撑计划项目（2011BAI01B06）；福建省科技重点项目