葛枣猕猴桃叶片蛋白质双向电泳体系的研究.pdf

《葛枣猕猴桃叶片蛋白质双向电泳体系的研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、安徽农业科学，JournalofAnhuingn．Sci．2014，42(22)：7307—7309，7350责任编辑李占东责任校对况玲玲葛枣猕猴桃叶片蛋白质双向电泳体系的研究许培磊，秦红艳，刘迎雪，王振兴，范书田，杨义明，艾军(中国农业科学院特产研究所，吉林长春l3ol12)摘要[目的]建立葛枣猕猴桃叶片蛋白质双向电泳体系。[方法]通过对不同的蛋白质提取方法、裂解液配方及IPG胶条的探索。建立适应于葛枣猕猴桃叶片双向电泳技术体系。[结果]TCA／丙酮法+配制裂解液较适用于葛枣猕猴桃叶片蛋白质组分析。最终可获得蛋白质点丰富、

2、分辨率高的双向电泳图谱，可以检测出450个清晰的蛋白质点。[结论]该研究为在蛋白质组水平揭示叶片颜色变化的调控机制奠定基础。关键词葛枣猕猴桃；叶片：蛋白质提取；双向电泳中图分类号S663．4文献标识码A文章编号0517—6611(2014)22—07307—03StudyofTWO-dimensionalElectrophoresisPIatformforAc~nidiapolygamaLeafPr0teomicXUPei-lei，AIJunetal(InstituteofSpecialWildEconomicAnimala

3、ndPlantScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Changchun，Jilin130112)Abstract[Objective]Theaimwastoestablishthetwo—dimensionalelectrophoresisplatformofActinidiapolygamaleaf．[Method]Differentproteinextractionmethod，crackingfluidformulationandlengthofthegelstrip

4、sweretested．[Result]Theresultshowedthatthemanualcon-feetcrackingfluidformulationwassuitablefortheleafproteindissolutionthanthesequentialextractionkit．450proteinspotsweredetectedandthehigh-resolutiontwo—dimensionalelectrophoresismapwasg0t．[Conclusion]Thestudylaidfou

5、ndationforrevealingregulatorymecha—nismofleafcolorchangesinproteomicsleve1．KeywordsActinidiaPolygama；Leaf；Proteinextraction；Two—dimensionalgelelectrophoresis葛枣猕猴桃[Actinidiapolygama(Sieb．etZucc．)Max—样品，速冻于液氮中带回实验室，保存在一80℃冰箱中待用。im]系猕猴桃科猕猴桃属多年生藤本植物，其果实多汁，酸甜1．2主要试剂IPG胶

6、条、SDS、N，N’一甲叉双丙烯酰胺、适口，风味独特，主要含有多糖、有机酸、氨基酸、黄酮、多种TEMED、AP、DTF、TBP、PMSF、载体两性电解质(bio—lyte)、维生素等，还含有较丰富的超氧化物歧化酶，主要分布于CHAPS、B一巯基乙醇、矿物油、低熔点琼脂糖、尿素等试剂、我国东北、华北，朝鲜、日本及苏联远东地区。葛枣醇具有顺序提取试剂盒购自美国Bio—Rad公司。碘乙酰胺、硫脲较高的药用价值，在韩国一直用作治疗风湿性关节炎的民购自Sigma公司。PVPP、丙烯酰胺为进口分装。抗坏血酸、甘间药物。氨酸、三氯乙酸、蔗

7、糖、Tris—base、苯酚、EDTA以及其他常用目前，研究者对葛枣猕猴桃的研究多集中在有效化学成试剂均为分析纯。所用水均为MilliQ水。分研究、无性繁殖技术、杂交育种研究、采后生理及产品开发1．3主要仪器分光光度计，PROTEANIEFCell等电聚焦研究等，尚未见关于葛枣猕猴桃彩叶机理的研究。在其系统，Mini．PROTEAN3和PROTEANHxiCell垂直电泳系统，他植物上，研究者通过色素组成、叶绿体和细胞核等方面对PDQuest凝胶图像分析软件均购自美国Bio—Rad公司。叶片出现异色的番茄、玉米、小麦等进行了

8、研究，结果发PowerLook2100XL扫描仪购自美国UMAX公司。现，异色叶组织的叶肉细胞出现了差异”，超微结构显示，1．4葛枣猕猴桃叶片蛋白质提取方法红楹木叶片由红色变为红绿再变为绿色的过程中叶绿体、基1．4．1酚提取法。称取1g叶片迅速液氮研磨，加0．1g粒及淀粉均发生了变化。研究