结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关.ppt

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1、结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关林洁南方医科大学基础医学院病理学系南方医科大学南方医院病理科背景Tiam1:T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1Tiam1与肿瘤的增殖、侵袭和转移Tiam1的表达调控机制尚未完全阐明表观遗传学：DNA异常甲基化蓝色区域为CpG岛，该CpG岛长2183bp，跨越启动子和第一外显子，存在256个CpG位点Tiam1基因5’端CpG岛预测去甲基化药物处理HT29细胞前后Tiam1mRNA表达1.SW6202.HT29(5-aza-dC)3.HT29(对照)C.空白对照GAPD

2、H(580bp)Tiam1(252bp)marker123cⅠ.116例配对结直肠癌组织中Tiam1蛋白的表达Tiam1蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布*Z=-4.608，P＝0.000#Z＝-3.115，P＝0.002Z＝-2.584，P＝0.01Tiam1蛋白表达与结直肠癌转移的关系Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系Ⅱ.结直肠癌组织中Tiam1基因异常甲基化的研究MSP原理CMU2n2t12n12t31n31t48n48t83n83t116n116tmu212314883116n

3、t部分配对组织中Tiam1DNA甲基化及其蛋白表达情况MSP扩增产物测序部分结果umoo.未转化的原始序列m.甲基化引物扩增产物u.未甲基化引物扩增产物Z=-2.244,P=0.025r=-0.494,P<0.001116例配对组织中Tiam1基因的甲基化状况232例组织中Tiam1蛋白表达与甲基化之间的相关性肿瘤组织Tiam1甲基化状态与临床病理资料之间的关系Ⅲ.结直肠癌细胞株中Tiam1基因异常甲基化的研究Tiam1高表达结直肠癌细胞株：LoVo细胞、SW620细胞Tiam1低表达结直肠癌细胞株：LS

4、174T细胞Tiam1不表达结直肠癌细胞株：HT29细胞5-aza-dC处理对Tiam1mRNA在HT29及LS174T中表达的影响GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)1234cmarkerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC5-aza-dC（+）X2005-aza-dC（-）X200免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对HT29细胞中Tiam1蛋白表达的影响免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响5-aza-

5、dC（-）X2005-aza-dC（+）X2001.SW6202.HT293.HT29(5-aza-dC)4.SW6205.LS174T6.LS174T(5-aza-dC)123456GAPDHTiam1Westernblot法检测5-aza-dC处理对HT29、LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响结论Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因DNA异常甲基化可能是结直肠癌Tiam1基因表达改变的重要调控机制之一谢谢！致谢：丁彦青教授李建明教授金贺博士张香梅博士李婷婷硕士