尿中δ—氨基—γ—酮戊酸δ—ALA的测定.ppt

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1、实验十二铅作业人群的健康监护训练二尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的测定[临床意义]铅吸收或铅中毒时，尿中δ-氨基-γ-酮戊酸（δ-ALA）的含量增高，故测定尿中δ-ALA的含量，有助于了解铅吸收和铅中毒的诊断。特异性，灵敏性均较差尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的测定——乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛基比色法尿中δ-ALA+乙酰乙酸乙酯吡咯化合物（经乙酸乙酯提取）+显色剂（对二甲氨基苯甲醛)→红色化合物原理100℃PH=4.6分光光度计；水浴锅，电炉；离心机(1500-2000r/min)；具塞比色管10m

2、120支；移液管2m11支；吸管10m14支、5m11支、2m12支；离心管10m110支。仪器：乙酰乙酸乙酯；乙酸乙酯；醋酸盐缓冲液；对—二甲氨基苯甲醛显色剂；ALA标准溶液；试剂：标准色列制备与标准曲线绘制尿样测定：测定前须用比重计测定尿比重分析步骤：试剂管号012345样品管空白管ALA标液（ml）0.00.10.30.50.71.0尿样1.0尿样1.0蒸馏水（ml）2.01.91.71.51.31.01.01.0乙酸缓冲液（ml）2.0乙酰乙酸乙酯（ml）0.4乙酸缓冲液0.4混匀，沸水中加热10分钟，冷却至室

3、温乙酸乙酯（ml）4.0加塞振摇1分钟，静置分层离心5分钟提出液2ml于另具赛比色管中，加2ml显色剂，加塞振摇，静置10分钟分光光度计，波长554nm，零管参比乙酸乙酯参比1．标准曲线的绘制2．样品管吸光度减去尿样空白管吸光度，查标准曲线得样品管中ALA含量(μg)3．计算公式：（1）尿样比重在正常范围（1.010-1.035）内尿中ALA(mg／L)=样品管中ALA含量(μg)（2）尿样比重不在正常范围内尿中ALA(mmo1／L)=××0.0076计算样品管含量（μg）1（尿样）1.020-1.000尿比重-1.0

4、00乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。显色剂宜新鲜配制。加入显色剂后，静置10分钟，应在半小时内完成比色。尿样易腐败，可导致pH增高，影响测定结果。如不能及时测定，应将尿样保存在冰箱中。乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品，显色剂宜新鲜配制参比液有两种：标准色列：零管样品管：乙酸乙酯注意事项：