尿中δ—氨基—γ—酮戊酸δ—ALA的测定.ppt

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1、实验十二铅作业人群的健康监护训练二尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的测定[临床意义]铅吸收或铅中毒时,尿中δ-氨基-γ-酮戊酸(δ-ALA)的含量增高,故测定尿中δ-ALA的含量,有助于了解铅吸收和铅中毒的诊断。特异性,灵敏性均较差尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的测定——乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛基比色法尿中δ-ALA+乙酰乙酸乙酯吡咯化合物(经乙酸乙酯提取)+显色剂(对二甲氨基苯甲醛)→红色化合物原理100℃PH=4.6分光光度计;水浴锅,电炉;离心机(1500-2000r/min);具塞比色管10m

2、120支;移液管2m11支;吸管10m14支、5m11支、2m12支;离心管10m110支。仪器:乙酰乙酸乙酯;乙酸乙酯;醋酸盐缓冲液;对—二甲氨基苯甲醛显色剂;ALA标准溶液;试剂:标准色列制备与标准曲线绘制尿样测定:测定前须用比重计测定尿比重分析步骤:试剂管号012345样品管空白管ALA标液(ml)0.00.10.30.50.71.0尿样1.0尿样1.0蒸馏水(ml)2.01.91.71.51.31.01.01.0乙酸缓冲液(ml)2.0乙酰乙酸乙酯(ml)0.4乙酸缓冲液0.4混匀,沸水中加热10分钟,冷却至室

3、温乙酸乙酯(ml)4.0加塞振摇1分钟,静置分层离心5分钟提出液2ml于另具赛比色管中,加2ml显色剂,加塞振摇,静置10分钟分光光度计,波长554nm,零管参比乙酸乙酯参比1.标准曲线的绘制2.样品管吸光度减去尿样空白管吸光度,查标准曲线得样品管中ALA含量(μg)3.计算公式:(1)尿样比重在正常范围(1.010-1.035)内尿中ALA(mg/L)=样品管中ALA含量(μg)(2)尿样比重不在正常范围内尿中ALA(mmo1/L)=××0.0076计算样品管含量(μg)1(尿样)1.020-1.000尿比重-1.0

4、00乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。显色剂宜新鲜配制。加入显色剂后,静置10分钟,应在半小时内完成比色。尿样易腐败,可导致pH增高,影响测定结果。如不能及时测定,应将尿样保存在冰箱中。乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品,显色剂宜新鲜配制参比液有两种:标准色列:零管样品管:乙酸乙酯注意事项:

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