5-氨基酮戊酸光动力疗法(ala-pdt)对白色念珠菌生物膜的影响

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1、万方数据复旦大学硕士学位论文5一氨基酮戊酸光动力疗法(ALA—PDT)对白色念珠茵生物膜的影响Effectsof5一AminolevulinicAcidPhotodynamicTherapy(ALA—PDT)onCandidaalblcansBiofilms院系：复旦大学附属华山医院专业：口腔临床医学姓名：史航导师：孙红英万方数据目录IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIlY丝644鲍中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第一部分白色念珠菌生物膜体外模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯133讨论

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16第二部分ALA对白色念珠菌生物膜最佳作用参数的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·191材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯223讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·27第三部分ALA．PDT对白色念珠菌生物膜的抑制效果⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一29引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·291材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯333讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·38全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·4l本研究的特色与创新⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘43附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47课题资助基金⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘56致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·57万方数据复旦大学硕士学位论文5一氨基酮戊酸光动力疗法(ALA—PDT)对白色念珠菌生物膜的影响中文摘要目的2本实验通过体外建立白色念珠菌(Candidaalbicans)生物膜模型，在此基础上探索5一氨基酮戊酸光动力疗法(ALA—PDT)

6、对白色念珠菌生物膜活性及结构上的抑制效果，寻找最佳ALA孵育时间、最佳ALA用药浓度、最佳光照剂量等光动力参数，为今后进一步将ALA-PDT推广到临床用于治疗口腔白色念珠菌感染性疾病提供理论依据。方法：1．建立白色念珠菌生物膜体外模型：选择白色念珠菌标准株ATCC90028，分别用96孔细胞培养板和玻璃圆皿培养白色念珠菌生物膜。结合结晶紫染色、荧光双染色的方法，利用普通光学显微镜及激光共聚焦扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscopy，CLSM)对白色念珠菌生物膜的形成过程及结构进行超微结

7、构的观察与定性分析，并采用甲基四氮盐(XTT)减低法对生物膜的生长动力学进行定量分析，为之后的实验奠定模型基础。2．研究ALA对白色念珠菌生物膜的最佳作用参数：运用荧光分光光度仪检测ALA在生物膜内的吸收和转化为PpIX的情况，研究ALA在白色念珠菌生物膜内的最佳参数，确定最佳ALA孵育时间和最佳ALA用药浓度，为之后的实验提供理论依据。3．评估ALA-PDT对白色念珠菌生物膜的影响：本部分实验建立在前两部分研究的基础上，利用CLSM检测ALA-PDT过程中不同光照剂量对白色念珠菌生物膜活性的抑制作用，计算杀菌率的变化

8、，并定量分析ALA-PDT对生物膜结构的破坏效果，计算生物膜平均厚度的变化，最终确定最佳光照剂量。万方数据复旦大学硕士学位论文结果：1．白色念珠菌生物膜的体外模型建立白色念珠菌ATCC90028培养48h后，经结晶紫染色及光学显微镜观察，可见生物膜紧密附着于载体底部，不被外力吹打和PBS洗涤所破坏。经荧光双染色及CLSM观察，可见