应用高葡萄糖钳夹技术评估高糖喂养小鼠胰岛细胞功能.pdf

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1、应用高葡萄糖钳夹技术评估高糖喂养小鼠胰岛细胞功能张明亮朱云霞尹德超李羚陆俊茜王琛贾伟平[摘要］目的利用高葡萄糖钳夹技术探讨高糖喂养小鼠胰岛β细胞功能。方法将16只4周龄C57BL/6J品系小鼠随机数字表法分为2组（各8只），分别用高糖与普通饲料喂养,8周后行腹腔葡萄精耐量实验比较2组小鼠葡萄糖耐量，行胰岛素耐量实验比较2组小鼠外周组织对胰岛素的敏感性，应用高葡萄糖钳夹技术比较模型小鼠在体胰岛β细胞第1时相和第2时相胰岛素分泌改变。钳夹实验结束3～4d后麻醉动物，取小鼠肝脏，利用庚烷-异丙醇-吐温的方法提取肝脏内甘油三

2、酯及总胆固醇。组间数据比较采用t检验。结果喂养10周时，高糖组小鼠体质量[(18.o±0.8)g]低于普食组[(23.6±0.5)g]，2组差异有统计学意义(t=5.595，P＜0.05)。高糖组糖耐昔曲线下面积为(103±3)mmol/L，显著高于普食组的(91±3)mmol/L(t=2.487，P＜0.05)。普食组葡萄糖利用指数(KITT)与高糖组差异无统计学意义（分别为0.53±0.08和0.54±0.14，t=2.360,P＞0.05）。高葡萄糖钳夹显示，高糖组第1时相胰岛素水平较普食组下降了49.6％[分

3、别为(0.71±0.26)和(1.41±0.44)μg/L;=2.943,P＜0.05]；高糖组平均葡萄糖输注率为(6.8±2.2)mg·kg-1·min-1，也较普食组的(20.2±2.3)mg·kg-1·min-1降低了66.3％（t=4.206，P＜0.05）。结论高糖喂养早期(8周)，小鼠发生葡萄糖耐量降低，主要为胰岛β细胞第1时相胰岛素分泌减弱所致，并非外周胰岛素敏感性改变引起。糖尿病；小鼠；高葡萄糖钳夹技术；胰岛β细胞Evaluatingpancreaticβcellfunctioninsucrose-f

4、edmicebyhyperglycemicclamptechniqueZHANGMing-liangZHUYun-xiaYINDe-chaoLILingLUJun-xiWANGChenJIAWei-pingDepartmentofEndocrinologyandMetabolism,ShanghaiDiabetesInstitute,ShanghaiSixthPeople'sHospitalaffiliatedtoShanghaiJiaoTongUniversity,Shanghai200233,ChinaObjec

5、tiveToevaluatethepancreaticβcellfunctioninsucrose-fedmicebyhyperglycemicclamptechnique.MethodsSixteenC57BL/6Jmicewererandomlydividedintotwogroupsandfedwitheitherhighsucrosediet(n=8)orchowfood(n=8)for8weeks.Intraperitonealglucosetolerancetest(IPGTT)wascarriedout

6、todetectglucosetolerance,intraperitonealinsulintolerancetestwasappliedtodetectperipheralinsulinsensitivity,hyperglycemicclamptechniquewasusedtodetectthefirstandsecondphaseofinsulinsecretioninthetwogroups.Liverlipidswereextractedwithheptane-isopropanoltweenmetho

7、dsinthemice.Thedatawascomparedbetweenthetwogroupsbyusingttest.ResultsIncontrasttochow-fedmice,thebodyweightofsucrose-fedmicedecreasedby23.4％((23.6±0.5)gand(18.0±0.8)g,respectively;t=5.595,P＜0.001).TheareaundertheIPGTTcurvefromsucrose-fedmicewasmuchhigherthantha

8、tfromchow-fedmice((103±3)mmol/Land(91±3)mmol/L,respectively;t=2.487,P＜0.05).Nodifferencecouldbeobservedinglucosedisappearancerate(KITT)betweenthetwogroups(0.53±0.08and0.54±0