[精品]乙型肝炎病毒基因型与临床的相关性研究.doc

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1、乙型肝炎病毒基因型与临床的相关性研究乙型肝炎病毒基因型与临床的相关性研究【摘耍】目的分析乙型肝炎病毒基因分型与临床的相关性。方法随机选择山东地区HBV-DNA阳性患者249例,其屮无症状携带者（ASC）53例,慢性活动性肝炎（CAH）126例,肝硬化（LC）38例,重型肝炎（FHF）32例。用型特异性引物巢式PCR快速检测HBV基因型。结果C基因型124例（49.8%）,B基因型84例（33.7%）,B+C混合基因型41例（16.5%）oC基因型在活动性肝病（CAH、LC、FHF）中占优势，而ASC组则是以B基因型为主,差异有显著性（❷P❷〈0.01）。CAH组患者不同基因型的基本特征:C

2、基因型及B+C基因型感染者ALT水平及HBV-DNA定量均显著高于R基因型组（❷P〈❷0.01）,不同基因型组间，年龄、性别无显著性差异（❷P❷〉0・05）;B基因型组中HBV-DNA定量及ALT水平均较C基因型组为低，具有显著性差异（❷P❷〈0.01）oHBeAg阳性率与性别、年龄及基因型的关系:三组基因型之间HBeAg阳性率比较，差异有统计学意义（❷x❷❷2二9.2&❷P❷二0.0098）,经❷x❷❷2分割比较:发现C基因型组HBeAg阳性率高于其他两组（❷卩❷〈0.01）;各组不同性别之间HBeAg阳性率比较差异均无统计学意义（❷P❷〉0・05）;HBeAg阳性率有随年龄增长而降低的

3、趋势，经趋势检验,除B基因型女性和B+C基因型女性两组人数较少，未得到有统计学意义的结果外，其余7组均有统计学意义。结论在ASC中，以B基因型为优势基因，而在活动性肝病（包括慢性活动性肝炎、肝硬化、重型肝炎）屮，以C基因型为多见，提示基因型与疾病活动性可能存在一定的关系。【关键词】乙型肝炎病毒;基因型;临床【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A［文章编号】1814-8824（2009）-09-0022-03乙型肝炎病毒(HBV)感染是一全球性健康问题，感染后既可表现为急性或暴发性肝炎，也可表现为各种慢性感染，如无症状携带者、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌。HBV感染的肝损害主要由免疫

4、机制所介导，而影响免疫应答的因素有感染吋的年龄、个体的遗传素质和病毒的基因变异，后者影响病毒抗原的表达。当前，基于全核廿酸序列比较,可分成8种不同的A、H基因型，应用HBV基因分型，研究其不同的临床特点,我们对249例慢性HBV-DNA阳性者进行基因分型，分析其与临床的相关性。1对象与方法1.1标本来源249例慢性HBV-DNA阳性者均为门诊和住院病人男186例，女63例，平均年龄(33.8±14.6)岁，其中无症状携带者(ASC)53例，慢性肝炎(CAH)126例，肝硬化(LC)38例，重型肝炎(FHF)32例,所有病例均为山东省当地汉族居民，诊断均符合2000年全国病毒性肝炎会议制定的

5、标准。通过适当的临床和实验室方法排除所有引起慢性肝病的其他因索，如HCV感染、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎和代谢失调等。1.2血清学检验血清用来检测肝功能、乙肝五项病毒学指标(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)及HBV-DNA,剩余血清在-70°C保存备用。肝功能测定:将样本进行3000转/min分离血清，然后取血清直接用Beckman全自动生化分析仪测定。乙肝五项指标的测定:采用双夹心ELISA法，试剂盒购自厦门泰伦生物工程有限公司，仪器为美国DENLEY自动酶标洗板机、BIORAD450型酶标仪。HBV-DNA定量:采用荧光定量PCR法,试剂盒由中山医科大学达安

6、基因诊断中心提供。PCR扩增仪为美国PE5700全自动分析仪。1.3HBV基因分型先通过外引物进行第一轮PCR,然后，将6对型特异性引物分到两个反应体系(MixA和MixB)中分别对第一轮扩增产物进行第二轮PCR,根据阳性结果判断出样本的基因型。1.4统计学分析组间均数比较用❷t❷检验，率的比较用❷x❷❷2检验，不同基因型HBV感染CAH的基本特征比较用q检验,HBeAg阳性率与性别、年龄及基因型的关系用❷x❷❷2检验、❷x❷❷2分割检验和趋势检验，❷P❷〈0.05具有统计学意义。所有数据均通过电脑用SPSS10.0进行统计处理。2结果2.1慢性HBV感染者的基因型分布249例HBV-DN

7、A阳性感染者，男186例，女63例，其中ASC53例,CH126例,LC38例,FHF32例,B基因型84例（33.7%）,C基因型124例（49.8%）,B+C基因型41例（16.5%）,未发现其他基因型的存在。ASC组以B基因型为主，而C基因型则在活动性肝病（CAH、LC、FHF）中占优势,差异有显著性（❷P❷＜0.05）o（表1）。2.2CAH组患者不同基因型的基本特征C基因型及B+C基因型感染者ALT水平及HBV