液相色谱-串联质谱法测定甲壳类水产品中氨基脲的含量.pdf

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1、第4O卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第1O期2012年l0月ChineseJournalofAnalyticalChemistryl530～l535液相色谱一串联质谱法测定甲壳类水产品中氨基脲的含量于慧娟李冰蔡友琼叶芳挺台建明惠芸华徐捷冯兵(农业部水产品监督检验测试中心(上海)，上海200090)(上海海洋大学，上海201306)(赛默飞世尔科技(中国)有限公司色谱与质谱科学仪器部，上海201206)(安徽省水产技术推广总站，合肥203061)摘要利用液相色谱一串联质谱技术测定了甲壳类水

2、产品中氨基脲的含量。样品用HC1水解、2_硝基苯甲醛衍生、乙酸乙酯萃取，液相色谱分离，串联质谱检测，内标法定量。方法检出限为0．25pg／kg(S／N~>3)；定量限为0．5gg／kg(S／N>10)。甲壳类水产品的品种涉及青虾、斑节对虾、罗氏沼虾、南美白对虾、小龙虾、青蟹、珍宝蟹、三疣梭子蟹、中华绒螯蟹和鲎等。虾类样品中氨基脲的含量在未检出～370．4~tg／kg之间，蟹类样品中氨基脲的含量在未检出～87．5gg／kg之间。氨基脲在甲壳中含量最高，在肌肉中含量最低。结果表明：氨基脲作为内源性物质普遍

3、存在于甲壳类水产品中。关键词氨基脲；内源性物质；甲壳类水产品；分布特征1引言氨基脲是一种联胺类小分子化合物，被认为是禁用药物呋喃西林的代谢产物。动物源性食品中氨基脲的残留通常是由于在动物养殖过程中使用了呋喃西林后代谢产生的]。目前，很多国家都以检测呋喃西林代谢产物——氨基脲判断是否在养殖过程中非法使用了呋喃西林，以达到对呋喃西林原药监控的目的。欧盟、El本及中国[21先后规定呋喃西林及代谢物在动物源性食品中不得检出。然而，从近年来我国青虾监督抽查和虾蟹苗种抽检过程中发现，氨基脲超标现象比较严重，尤其是

4、青虾产品，阳性率高达50％以上，使水产品的质量备受质疑，给养殖企业带来经济损失。在一些非动物源性食品(如婴儿食品、果汁、果酱、冰淇淋、布丁、酸奶及玻璃瓶包装的食品)和甲壳类水产品(虾和蟹)中均已检出氨基脲9】。非动物源性食品中的氨基脲主要来源于发泡剂偶氮酰胺和食品添加剂卡拉胶的使用，而鲜活甲壳类水产品中的氨基脲则作为内源性物质存在于甲壳类水产动物体中B，呋喃西林并非是氨基脲的唯一来源。为了弄清我国青虾和虾、蟹苗种氨基脲超标的原因，本实验通过对来自不同地点的虾、蟹等甲壳类生物体中氨基脲的研究，证实了甲壳

5、类生物体中会有氨基脲自然存在的现象；此结果从根本上解释了我国部分甲壳类水产品中氨基脲超标的原因，为重新评价水产品中氨基脲的残留提供了技术支撑。2实验部分2．1仪器与试剂ThermoTSQQantumAccess液相色谱一串联质谱仪(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)；TD5A-WS离心机(上海湘仪离心机厂)；Organomation氮吹仪(美国Organomation公司)。氨基脲盐酸盐和氨基脲同位素标准品(纯度≥99％，德国Dr．Ehrenstorfer公司)；甲醇、乙酸乙酯(色谱纯，Sigma公司)

6、；正己烷、HCI、NaOH(分析纯，上海国药集团)；2-硝基苯甲醛(纯度≥98％，德国Dr．Ehrenstorfer公司)。实验用水由Milli—Q纯水仪制备。2．2标准溶液配制2．2．1氨基脲标准储备液和标准中间液准确称取14．9mg氨基脲盐酸盐标准品，用甲醇溶解并稀释2012-02—22收稿；2012-05—25接受本文系农业部财政专项(No．2130109)资助’E—mail：yuhuijuan607@sohu．corn第1O期于慧娟等：液相色谱一串联质谱法测定甲壳类水产品中氨基脲的含量至10m

7、L棕色容量瓶中，即得1．0g／L标准储备液，一20℃保存，有效期6个月。取适量储备液，用水逐级稀释，配制成100和500g／L的标准中间液，4℃保存，有效期7d。2．2．2氨基脲同位素内标储备液和内标工作液准确称取10．0mg氨基脲同位素标准品，用甲醇溶解并稀释至10mL棕色容量瓶中，即得1．0g／L的内标标准储备液，一20℃保存，有效期6个月。取适量内标储备液，用水逐级稀释，配制成浓度为100g／L内标工作液，4℃保存，有效期7d。2．3样品来源青虾取自千岛湖、洞庭湖和南京养殖基地；斑节对虾、罗氏沼

8、虾、南美白对虾、小龙虾、青蟹、珍宝蟹及中华绒螯蟹取自上海市农贸市场；三疣梭子蟹取自上海市军工路码头；辫取自浙江舟山农贸市场。所有样品保存在低温条件下运回实验室，一2O℃冷冻保存。分析前将样品解冻至室温，按实验要求分别进行处理和均质混匀(蟹壳在60℃烘干后粉碎)，然后测定氨基脲的含量。2．4样品前处理方法2．4．1水解与衍生称取样品2．0g(精确到0．O1g)于50mL离心管中，加入0．05mL内标工作液，涡旋混合50S，放置20min使内标物完全渗透到样