等位基因分型标准物的法医应用及制备研究.doc

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1、等位基因分型标准物的法医应用及制备研究【摘要】短串联重复序3~(shrttanderepeats,简称STR)由于其本身的优点和检测技术的不断完善，在今后相当长的时间内仍将是法医应用的重要遗传标记。等位基因分型标准物是STR检测试剂盒的组成部分，能够保证各等位基因分型的准确性。本文对等位基因分型标准物的出现、在法庭科学上的应用以及目前制备方法进行了综述，并对各种制备方法进行比较，以期对各实验室按照实际需要自行制备相关STR的等位基因分型标准物在方法选择上有所帮助，从而更好地进行法医物证鉴定。【关键词】短串联重复序列；等位基因分型标准物；法医学应用【中图分类号】Q78【文

2、献标识码】A【文章编号】1007—9297(XX03—0231—04StudnthefrensiappIiatinsandthenstrutinfaIIeHIadder・UANIi,LUdi.(BeiinginstitutefFrensiediineandSiene,Beiing]4,hina)[Abstat]Shatanderepeats(STRs)aIeiprtantgenetiarersandideIusedinFrensiunitbeauseftheirsharateristisandadvanedexainetehniques・Alleiiladderisip

3、rtantpartfSTRitandensurethepreisegentpefaIleIi・ThisartiIestatestheappearaneandfrensiappIiatinfaIIeIiIadder,andaIsstudntheethdsfnstrutinfaIIeIiIadderurrentI、Thrughtheparisnsfthsenstrutinethds,thisissuetbesIvedtheIabratrtseIethihethdtnstru—tinaIleIiIadderardingitsneedsandnditinandtaethestf

4、thefrensiudge.[erdsIShrttanderepeats；AIIeIiIadder；FrensiappIiatin、等位基因分型标准物的出现PR—STR分型技术具有高效、快速'灵敏等优点，在个人识别'亲子鉴定、基因绘图上发挥了重要作用.【丨】已经成为法医物证鉴定的主流技术。虽然单核昔酸多态性(singIenuIetidepIrphis,艮卩SNP)被广泛称为第三代DNA遗传标记，但由于其成本高，实际操作困难等.推广使用还需要很长一段时间。目前和今后相当长的时期内STR仍是主要使用的遗传标记。当使用以PR为基础的STR多态性的分析技术时。为了各基因座的等位

5、基因命名，需要一个能比对的标准物。早先测试STR的等位基因命名曾采用片断长度bp值方法，是与已知分子量标准物同步电泳并进行比较。这种分子量标准物虽然在本质上也是DNA但经多次实验发现这种方法存在较严重的缺陷：相同分子量的DNA片段和分子量标准在同一介质电泳时会出截然不同迁移率的条带。［31DNA在介质中的电泳迁移率在其他条相同的情况下不仅与其分子量有关，还受DNA自身的序列结构影响。序列不同的DNA片断在电泳动力学上存在差异，即使片断长度相同.它们的电泳迁移率却不一致。这样就不能准确进行STR分型。最早记载有等位基因分型标准物的是Budle等⑷建立的。他们从100名无关

6、个体中找出D1S80的16个等位基因.经测序命名后把它们混合作为“lad.der”.检测未知样品时.只需与该基因座的“ladder”比较即可得出这个基因座的基因型.当时用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显色。这种检测方法与在此之前的斑点杂交和Suthen印迹技术来检测限制性片段长度多态性方法相比有很多优点。在节约时间和降低错误率上尤为明显。argaret等在1996年通过不同分型标准物的比较.进一步证明使用等位基因分型标准物(alleiieladders)才能对等位基因进行正确分型，其数据才可以在实验室之间进行交换。圈二、等位基因分型标准物的概念及法医学应用等位基因分型

7、标准物(allelieladder)是人群中常见的等位基因混合物，用来与未知样品比对确定基因【作者简介】袁丽(1971-),女，硕士研究生，江西九江人，主要从事法医DNA检验工作。Tel:+86-10-68621174；E—aiI:uanIi—ah..n■232-型。同一检材用不同的引物序列进行扩增(不同作者设计的引物'退火位置不同，可能会出现同一靶座位上相同等位基因长度不同)或者用不同的探测平台来分析，那么出现的结果可能不一致。这时我们可以将该结果与对应的alleiiIadder相比较，等位基因峰值就可以准确地转换成基因分型。而后者是最