不同糖浓度对体外培养小鼠成纤维细胞增殖、分化的影响【临床医学毕业论文设计】.doc

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1、临床医学论文•不同糖浓度对体外培养小鼠成纤维细胞增殖'分化的影响作者：李盛，石汉平，孙冠青，孟锐【摘要】【关键词】创伤愈合成纤维细胞血糖应激反应Abstract:ObjectiveTofindtherelationshipbetweenglucoseconcentrationandtheproliferationoffibroblast.MethodsTheproliferationofmousefibroblastwastestedindifferentconcentrationofglucoseat12h,24h,48hwit

2、hCCKkit.Theamountoftheoutccl1typeIcollagenfiberswastestedbythemousetypeIcollagenElisakit,andtheexpressionofasmoothmuscleactin(aSMA)testedbyimmunochemistry.ResultsWefoundthatunderthemediumoflowconcentration,theproliferationwasmuchmorethanthatinthehighconcentrationgroup

3、safter12h,24hand48h(P<0.01),namelytheconcentrationwasnegativelycorrelatedwiththeproliferationJVetestedtheoutcelltypeIcollagenfibersusingthemousetypeIcollagenElisakit,buttherewasnodifferencebetweeneachgroup(P>0.05).AbouttheexpressionofmouseaSMA,positivecorrelationwasfo

4、undbetweentheglucoseconccntrationandtheexpressionofthemouseaSMA.ConclusionAttheoriginalaugmentationofthebloodglucose,theproliferationoffibroblastisnotdifferent.Butwhenitgetsoveralevel,theproliferationwi11bedepressed,whichcanleadtothedelayofthehealingofrawsurface；theco

5、ncentrationofglucosehasnothingtodowiththeoutcelltypeIcollagenfibers；thcconcentrationofglucoseisafactorwhichenhancesthevariationfromfibroblasttomyofibroblast,andtheconcentrationofglucoseispositivelycorrelatedwiththetendencyofthevariation.Keywords：woundhealing;fibroblas

6、t;bloodglucose;stressreaction在外科危重患者川常常遇到高血糖，其屮主要是存在许多糖尿病患者，糖尿病损伤修复吋，损伤组织的高糖环境对成纤维细胞的生长有着很大影响，使得创面愈合这一过程变得更为复杂。血糖持续升高可使机体产生一系列的不良反应，增加机体高渗性昏迷、糖尿病酮症酸中毒发生的可能性，严重危及生命。高血糖的发生捉示机体处于代谢紊乱状态，其持续存在更增加了感染的风险。因此如何应对创伤伴随高血糖并发症的出现，一直是创伤外科亟待解决的问题。创伤愈合是一个复杂而有序的生物学过程，涉及炎症反应、细胞增殖、迁移，创

7、面重塑等多个序贯又相互交叉的病理生理过程。硏究已发现成纤维细胞(fibroblast)在此修复过程中起着十分重要的作用。长期以来它也一直被视为是肉芽组织收缩的能量供应者，对伤口有效而迅速的关闭起着重要的作用。肌成纤维细胞被认为是由创口周围的丿支肤、皮下组织中的成纤维细胞在各种刺激因子的作用下转变而来'其分泌的肌动蛋白(asmoothmuscleactin,aSMA)被普遍认为是肌成纤维细胞表型的可靠证据。本实验利用小鼠成纤维细胞培养，在体外模拟高血糖的坏境，设定不同糖浓度，硏究不同时间下成纤维细胞生长增殖情况和胶原合成情况，从而为

8、了解不同糖浓度下成纤维细胞增殖情况奠定体外试验基础。材料与方法1主要试剂胎牛血清高糖DMEM培养基（购自Gibico）CellCountingKit8试剂盒（购自碧云天试剂公司），羊抗小鼠I型胶原抗体，羊抗小鼠肌动蛋白单克降抗体（购自SanIa），