微生物检验技术项目四 微生物培养基的配制.pptx

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1、微生物检验技术第二模块微生物检验常规技术四、微生物培养基的配制五、消毒灭菌技术六、微生物的分离、纯化、培养技术七、微生物染色及显微形态观察技术八、微生物的计数技术九、菌种保藏技术十、血清学检验技术培养基的分类1项目四微生物培养基的配制选用或设计培养基的基本原则2项目四微生物培养基的配制了解培养基的种类及不同培养基的用途；掌握培养基的配置原则、要求和注意事项。知识目标项目四微生物培养基的配制能根据工作目标选择合适的培养基；能够正确配置微生物检验中常用的培养基；能采取合理的方法使用、保存培养基并进行质量控制能力目标项目四微生物培养基的配制微生物检验中无论是检测待检

2、样品中微生物的数量、种类，还是观察样品中的微生物形态，特征，首先都需要选用合适的培养基对样品中的微生物进行分离、培养，才能进行后续工作。背景知识一、培养基的分类1.天然培养基是利用各种动物、植物、微生物或其它天然成分为营养基质而制成的。2.合成培养基是用已知成分和数量的化学药品配制而成的培养基。3.半合成培养基以天然有机物作为碳、氮等主要营养源，用化学试剂补充无机盐配制而成的培养基称为半合成培养基。（一）根据培养基营养成分的来源划分一、培养基的分类1.液体培养基把各种营养物质定量溶解于水中，调节适宜的pH，即制成了液体培养基。2.固体培养基实验室中常用的固体培

3、养基是在液体培养基的基础上加入适量凝固剂而制成的，其中琼脂是应用最为广泛、最优良的凝固剂。（二）根据培养基的物理状态划分一、培养基的分类3.半固体培养基如果在液体培养基只加入少量的凝固剂如0.2～1%琼脂，就制成了半固体培养基。4.脱水（商品）培养基脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。将各种营养成分按比例配一、培养基的分类1.增菌培养基2.选择培养基3.鉴别培养基4.活体培养基（三）根据培养基的用途划分二、选用或设计培养基的基本原则不同的微生物对营养有着不同的要求，在选用或设计培养基时，首先要明确培养基的用途，如用于培养何种微生物、培养目的如何等，根据

4、不同的菌种及其不同的培养目的从现成的培养基配方选用，或有的放矢地设计搭配营养成分及营养比例。（一）符合工作目标的要求二、选用或设计培养基的基本原则培养基中各种营养成分及比例关系主要是依据微生物细胞的化学组成分析而确定的。（二）符合微生物的营养特点二、选用或设计培养基的基本原则1.pH值微生物都有它们生长适宜的pH范围，一般细菌在pH7～8，酵母菌为pH3.8～6.0,霉菌为pH4.0～5.8。2.渗透压当环境中的渗透压与微生物细胞原生质的渗透压在等渗条件下最适宜微生物的生长。（三）符合菌种对理化环境的要求二、选用或设计培养基的基本原则在所选培养基成分能满足微生

5、物培养要求的前提下，尽可能选用价格低廉，资源丰富，运输方便，无毒性的材料作培养基成分。（四）符合物美价廉的原则二、选用或设计培养基的基本原则【任务验收标准】1．掌握培养基的配制程序和操作要点；2．能够进行实验室常用固体、液体培养基的配制；3．能够进行培养基的分装、灭菌、及无菌检查；4．能够采用适当的方法保存培养基的并进行质量监控任务4-1配制常用的微生物培养基二、选用或设计培养基的基本原则【任务完成条件】1．待配各种培养基的试剂及材料，琼脂，1mol/LNaOH溶液，1mol/LHCl；2．高压蒸汽灭菌锅、天平或台秤、三角瓶、烧杯、试管、培养皿、移液管、量筒、

6、玻璃棒、药勺、称量纸、牛皮纸、棉花、线绳、纱布等。二、选用或设计培养基的基本原则【工作任务】1．配制细菌、酵母菌、霉菌常用的培养基2．配制常用的鉴别培养基二、选用或设计培养基的基本原则【任务指导】一、培养基的配制1．做好配制前准备工作，填写培养基制备记录2．培养基的配制3．培养基的分装及灭菌前包扎图4-1培养基的试管分装图4-2培养基分装设备二、选用或设计培养基的基本原则（1）试管的分装及包扎图4-3棉塞的要求图4-4移液管的包扎1.正确的式样2.头部太大3.头部过小4.整体太松5.头部过松，底部过紧二、选用或设计培养基的基本原则（2）移液管的包装（3）三角瓶

7、的分装及包扎图4-5三角瓶的包装A—配制时纱布塞法B—灭菌时包牛皮纸C—培养时纱布翻出（4）培养皿的包装二、选用或设计培养基的基本原则4．灭菌培养基分装包扎后应立即进行高压蒸汽灭菌，一般可采用121℃灭菌20分钟。玻璃器皿可进行高压蒸汽灭菌，也可进行干热灭菌。二、选用或设计培养基的基本原则5．斜面及平板的制备图4-6斜面的放置图4-7到平板a.叠皿法b.持皿法二、选用或设计培养基的基本原则6．培养基的质量控制及无菌检查每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，液体培养基应澄清，固体培养基应无絮状物或沉淀，凝胶强度适宜，用接种环划线时以培养基不被划破为宜。二、选用或

8、设计培养基的基本原则固体培养基分装后有