儿童支气管哮喘急性发作时血清M2受体抗体的表达及临床意义.doc

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1、儿童支气管哮喘急性发作时血清M2受体抗体的表达及临床意义［摘耍］目的通过检测儿童哮喘急性发作时M2受体抗体的变化来探讨M2受体抗体对哮喘发作的影响。方法以合成的M2受体多肽片段为抗原，应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组血清中M2受体抗体阳性率及抗体滴度，其中哮喘急性发作组20例，哮喘良好控制组20例，正常对照组30例。结果M2受体抗体阳性率和抗体滴度在哮喘急性发作期组(60.0%,1：90)与正常对照组(6.7%,1：20)、哮喘良好控制组(20.0%,1:30)比较差异均有高度统计学意义(均P<0.01)o结论M2受体抗体参与了儿童哮喘急性发作的过程并在其中

2、起重要作用。［关键词］儿童；哮喘；M2受体抗体［中图分类号］R562.25［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2014)09(b)-0078-03支气管哮喘是由多种炎症细胞参与的气道慢性炎症。易感者对多种激发因子具有气道高反应性，并可引起气道狭窄，反复出现发作性喘息、呼吸怵I难、胸闷、咳嗽等症状，严重影响患儿身心健康，是当今世界最常见的慢性疾病之一。目前对哮喘的治疗已经规范，但对其病因、发病机制等仍有许多不明之处，各方均在进行有意义的探讨。近年来有许多学者对气道副交感神经毒蕈碱受体进行了研究，其中毒蕈碱M2受体的研究最为深入，引起了广泛关注［1-2］,木研究

3、主耍是通过检测儿童哮喘急性发作和良好控制时M2受体自身抗体的变化，来探索哮喘急性发作机制。1资料与方法1.1一般资料所有对象均来源于江苏大学附属医院，将英分为三组：①哮喘急性发作组：2011年10月〜2012年4月在儿科住院的哮喘患儿，随机选择20例，男11例，女9例；年龄13个月〜14岁，其中0.05),具有可比性。采集受检查者清晨空腹静脉血5mL,离心取血清后-20°C储存，备用。本研究已经医院伦理委员会通过，家属均知情同意。1.2指标检测抗原肽段用固相多肽合成法，由深圳晶美生物技术有限公司合成，相当于人M2胆碱能受体细胞外第二环氨基酸序列的特异性抗原决定簇。M2肽

4、段为169〜193位的氨基酸序列:V-R-T-V-E-D-G-E-C-Y-I-Q-F-F-S-N-A-A-V-F-G-T-A-I-C。经高压液相色谱分析，合成肽的纯度在95%以上。参照文献［5-6］方法，用SA-EIJSA检测M2受体抗体，抗体定性判定用比例法，以阳性血清与阴性血清的吸光度(A)之比来判定(即P/N比值)，P/NM2.1为阳性(P/N二A值标本-空白对照/A值阴性对照-空白对照)。判定抗体滴度：将血清标本从1?20起连续倍比稀释，出现P/N22.1的最高稀释度为该标本抗体的滴度。1.3统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行。计量资料以均数土标准差(x

5、±s)表示，计数资料采用x2检验，多组间的比较采用单因索方差分析，两两比较采用SNK法。儿何均数(G)表示抗体滴度的平均值，儿何均数的检验用经对数转换后的数据进行。2结果哮喘急性发作组M2受体抗体阳性率和抗体滴度均较正常对照组、哮喘良好控制组有明显增高，差异均有高度统计学意义（P0.05）o见表1。3讨论支气管哮喘是儿童常见的呼吸系统疾病，发病率高，口呈逐年增多趋势。常首发于婴幼儿，易反复发作，对患儿身心健康造成严重影响，并且家长误工、患儿误学，给家庭和社会都带来了沉重的经济负担。随着分子免疫学和分子遗传学的发展，哮喘发病机制的研究也有了进一步的深入和发展，但哮喘的发病

6、机制仍有许多不明之处，各方均在进行有意义的探讨。近年来有许多学者对气道副交感神经毒蕈碱受体进行了研究，其中毒蕈碱M2受体的研究最为深入、广泛。研究证实，经毒蕈碱（M）受体共有5个亚型（M1〜M5）,而人肺支气管平滑肌只表达其屮的3种（Ml、M2和M3）[7-8]o在气道平滑肌上，主要表达M2及M3受体，M2受体主要位于节后胆碱能神经纤维末梢，同时在小气道平滑肌上也有M2受体的分布。M2受体又称为自身受体，它的功能主要是通过负反馈的形式调节乙酰胆碱的释放[9]。兴奋性M3受体主要分布于气道平滑肌以及黏膜腺体，仅M3受体参与支气管平滑肌的收缩。迷走神经节后纤维释放乙酰胆碱，

7、刺激气道平滑肌上M3受体使肌肉收缩，同时乙酰胆碱与位于同一神经末梢的M2受体相结合，从而产生负反馈，抑制了支气管平滑肌的进一步收缩。M2受体能控制乙酰胆碱的释放，因此，M2受体在抑制迷走神经引起的支气管收缩中是起关键作用的。M2受体功能障碍时就会导致乙酰胆碱释放过多，过多的乙酰胆碱作用于气道平滑肌的M3受体，可引起气道平滑肌进一步收缩，同时黏液腺过度分泌，所以，本研究认为M2受体功能障碍和气道高反应密切相关。近年来已有研究证实M2受体功能障碍可导致气道高反应,进一步导致哮喘发作［10-ll］o关于M2受体功能障碍发生的机制还没有完全阐明，