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时间:2018-10-24
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1、抗核小体抗体在狼疮肾炎患者血清的表达及临床意义徐江霞梁林熊智敏霍颖(南昌大学第四附属医院检验科江丙南昌330003)【中图分类号】R593.24+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)18-0083-03【摘要】目的探讨血清抗核小体抗体(ArwA)检测在狼疮性肾炎(LN)患者中的临床意义。方法采用免疫印迹法检测26例LN和32例系统性红斑狼疮(SLE)无肾炎患者血清AnuA。并跟踪分析了11例LN患者治疗过程中血清AnuA与尿蛋白、尿红细胞、血清白蛋白的相关性。结果LN组与SLE无肾炎组
2、患者ArwA阳性率差异极显著性(P<0.001),LN组患者血清AnuA阳性率显著高于SLE无肾炎组(P<0.01);AnuA与LN患者的尿蛋白、尿红细胞呈正相关(P<0.01);血清AnuA与LN患者血清白蛋白呈负相关(P<0.01)。LN患者血清ANuA随着病情的好转,由强变弱直至转阴。结论血清AnuA的检测对于LN的诊断及疗效评价具有重要意义。【关键词】抗核小体抗体免疫印迹法系统性红斑狼疮狼疮性肾炎系统性红斑狼疮(SLE>是一种以体内出现多种自身抗体为特点的自身免疫性疾病,病变可
3、累及多个器官、多个系统。狼疮性肾炎(LN)是SLE主要的并发症,临床表现为蛋白尿、血尿、肾衰竭甚至发牛.尿毒症导致患者死亡。因此,适时监控系统性红斑狼疮患者肾脏是否有活动性炎症,对LN的判断、免疫抑制剂的及时应用至关重要,可阻止病情恶化。近年来,核小体及其抗核小体抗体(ArwA)在LN发病机制中的作用得到的重视,木文检测了26例LN和32例系统性红斑狼疮(SLE)无肾炎患者血清AnuA,旨在探讨AnuA在狼疮肾炎患者血清的表达及临床意义。1材料和方法1.1研究对象选取临床确诊的SLE患者58例,其中LN患者2
4、6例,女26例,18-68岁;无肾炎SLE患者32例,女31例,男1例,年龄19-69岁。诊断均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分类诊断标准[1]。近期未接受激素及细胞毒免疫抑制剂治疗。1.2方法1.2.1标本的采集与处理抽取患者静脉血,充分凝固后离心取血清保存于2-6'C冰箱,一周内检测。1.2.2AnuA检测LN组与无肾炎SLE组的AnuA的检测均采用德国欧蒙公司提供的免疫印迹法ANA谱(IgG)检测试剂盒,同吋检测抗dsDNA、RNP、Sm等14种抗原IgG类自身抗体。操作步骤:取包被了抗原的醋
5、酸纤维膜条置入反应槽中,字面朝上,加入1.5ml1:101稀释的血清,置摇床上室温摇摆温育30分钟,用洗涤液摇洗三次后加入1.5ml1:10稀释的酶标抗人IgG(酶结合物),室温摇摆温育30分钟,重复摇洗三次,加入酶底物温育10分钟以产生颜色反应,观察反应区内的颜色强度。与非抗原包被区域相比,阳性反应将在相应的抗原线处出现综色条带,根据棕色条带的深浅与标准带比较,判断结果:弱阳、+、++、如果结果肉眼不好判读,可用扫描仪判断。1.2.3统计学方法率的比较采用χ2检验。P<0.05认为差异有统计学
6、意义。2结果一、LN和SLE无肾炎患者血清ANuA检测结果:LN组与SLE无肾炎组患者血清ANuA阳性率差异具有显著性(P<0.001)。LN组患者血清ANuA定性结果阳性明显强于SLE无肾炎组(P<0.01)。二、LN患者治疗效果与ANuA阳性率关系跟踪观察了11例LN患者治疗过程中AnuA与尿蛋白、尿红细胞、血清闩蛋白的相关性,结果显示:AnuA与LN患者的尿蛋白、尿红细胞呈正相关显著性(P<0.01);AnuA与LN患者的血清白蛋白呈负相关(P<0.01)。LN患者血清AnuA随
7、着尿蛋白、血尿的消失而转阴,AnuA也随着血清白蛋白恢复正常而转阴。3讨论狼疮肾炎是SLE最严重的并发症,肾炎的严重程度直接与SLE预后有关,肾衰竭是SLE的主要死亡原因之一。虽然狼疮肾炎的发病机制错综复杂,但0前己公认狼疮肾炎是一种免疫复合物介导性肾炎[2】。核小体在狼疮肾炎的发生和病程进展中起着重要作用[3】。核小体(nucleosome)是真核细胞染色质基本重复结构的亚单位。Berden[4]等认为细胞凋亡是机体产生核小体唯-途径,冋吋凋亡过程还为这些抗原提供修饰,增强其免疫原性,当机体清除能力下降吋,
8、便激发自身免疫反应。生理情况下,凋亡形成的少量核小体可被邻近单核-巨噬细胞迅速吞噬而清除,而不诱导机体产生自身抗体,导致炎症反应,不能在外周血中检出凋亡核小体。病理情况下,大量细胞发生坏死或凋亡,产生核小体不能被及时清除,大量释放到细胞间质中,诱导机体产生一系列自身抗体,早期以AnuA为主,后期出现抗dsDNA抗体。核小体引起肾小球肾炎有两条重要途经[5】(1)核小体与AnuA结合形成的免疫免疫复合
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