酶联免疫吸附试验在布鲁氏菌病检测中的研究进展_臧金凤.pdf

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1、控？“”转型升级、提质增效、粪污处理、环保生态科技论文集《今ｇ書牧善医》增刊二、基础研究酶联免疫吸附试验在布鲁氏菌病检测中的研究进展臧金凤1尚佑军2孙继国1栾志舫21．河北农业大学河北保定071001）（（2．兰州兽医研究所甘肃兰州730（Ｍ6）布鲁氏茼病又称马耳他热或波浪热，是由布氏杆菌引起的人畜共患的自．然疫源性传染病，全世170界有超过多个国家和地区存在人和动物布鲁氏菌病的流行，导致了Ｈ大的经济损失和促成了严重的公共卫生何题。近年来’我国对布鲁氏菌病进行了检测和分析，发

2、现布鲁氏菌病疫情形势比较严峻，牛、羊布鲁氏菌病感染率上升较快，给畜牧业和人民身体健康造成了ｇ大的损失。因此需要加强对该病的检测和预防，为防制布鲁氏菌病提供保障。“”但当前布鲁氏菌的检测方法有多种，布鲁氏菌的分离培养是诊断布昝氏菌病故金标准，分窝率低、耗时长、生物安全要求较高、不适用于广泛应用；ＰＣＲ方法和基因探针方法特异性强、敏感性高，但基■组ＤＮＡ的提取也涉及到生物安全问题；虎红平板凝集试验操作简单、价格便食、操作快速，但易出现假阳性；试管凝集试验和补体结合试验是我国诊断布鲁氏菌病的法定确

3、诊方法，但操作相对复杂、方法繁琐费事、反应时间长、不适用于现场操作，而酶联免疫吸附试验ＥＬ一ＩＳＡ20世纪70（）是年代发展起来的种新型布鲁氏菌病快速检测技术，该方法简单、快速、敏感性高、特异性高、结果易于判定、易予标准化、可实现高通量检测，具有良好的应用前景ｓ2004Ａｒ—ＥＬＬＡ卫生组织＾竞争ＥＬＩＳ（Ｓ）被世界动物（（ＨＥ列为诊断和消灭牛布鲁氏菌病的，）推荐方法。1ＥＬＩＳＡ在布病检测方面的应用ＥＬＩＳＡ是免疫技术中应用最广的“种Ｓ每标记抗体或抗原与相，其基本原理是在适合

4、的载体上，一一定底物参与下应的抗原或抗体—成痛标记的抗原抗体免疫复合物’在，复合物Ｊｔ的酶催化底物一一，使其氧化、还原或水解成另种带色物质，由于在定条件下，酶的降解底物和呈现色泽成茁一比ＥＬＩＳＡ种与补体，所以，用酶标仪进行测定，从而计算出反应的抗原和抗体的种类和含量；ｓ是ＣＦＴ一既可以作为筛选试验还可结合试验（）效果相当的诊断方法，，次可以完成大量样本的检测⑴以作为确诊试验，不仅应用于血清抗体的检测，还可以用于乳样抗体的检测，但目前为止牛布一作者简介1第：＿金凤991硕士研究生研究方询为參？

5、食品01■德秦。通信地址：，女，年出生，柯北沧州人，，ｅ651－ｍａｉｌ793174甘粛省舍州市城关Ｋ徐家坪1号国农业科学院ａ州兽医研究所Ｔｌ：13038780Ｅ：1394？，，中，．ｃｏｍｑｑ0今＂”沿《ｇ書牧善医》增刊转型升级、提质增效、粪污处理、环保生态科技论文集＿ｃ—ＥＬ鲁氏菌病的ＩＳＡ为Ｏｆｉ列为推荐方法，其他种的布鲁氏菌病是现在研究的热点，目前常用于ＥＬＩＳＡＥＬＩＳＡｃ—ＥＬＩＳＡＥＬＩＳＡ—ＥＬＩＳＡＥＬＩＳＡ布鲁氏菌病检测的有竞争、ｉ、双抗体夹心（）间接（）Ｄ

6、ＡｂＳ—ＥＬＩＳＡＥＬＩＳＡＤｏ—ＥＬＩＳＡ（、斑点ｔ这几种检测方法在布病检测中起到非常重要的作）（），用。1—．1ｉＥＬＩＳＡ2［］一1976Ｃａｒｌｎ—此法被广泛应用于检测布鲁氏菌抗体ｓｓｏ次建立ｉＥＬＩＳＡ法检测人布鲁，年，第氏菌病，之后在多种动物上用该法进行检测。此后，儿位学者以传统的血清学方法作对照，采用羊ＬＰＳ一一ｉＥＬＩＳＡ方法ｉ布鲁氏菌未纯化的光滑型的的脂多糖（作为抗原，建立了，结果证明）ＥＬＩＳＡ一方法具有很强的特异性ｉＥＬＩＳＡ。目前在应用方法检测羊或奶牛布鲁氏菌

7、病时既可以选用血清，也可以选用奶样，有研究表明奶和血清的敏感性相同而奶的特异性比血清的高，如此说明在检测奶牛或羊布鲁氏菌病的时候可以用奶代替血样，排除了采血带来的麻烦，大大地提高了检测效3率［］ｏ4［］2004ＣＳａｅｒｍＧ三种血清一年．ｇｅａｎ等人评价了用单克隆抗体和蛋白作为过氧化躯合物的ｉ5［］ＥＬＩＳＡ—ＥＬＩＳＡ2012Ｐ诊断牛布鲁氏菌病的效果ｉｒａｕｄ，得出的敏感性和特异性都非常高。年提一ｉＥＬＩＳＡ方法可以很好的避免补体结合试验ＣＦＴ出（在布鲁氏菌病检测诊断中的局限性，并建

8、）议必要时可以组合这两种方法进行检测诊断ＣＦ—ＥＬＩＳＡ2011。补体结合酶联免疫吸附试验（）在已被毛开荣等人提出一—一此方法与ｉＥＬＩＳＡ进行比较ＣＦＥＬＩＳＡｉＥＬＩＳＡ年就，并将，结果显示，与ＰＢＰＴＳＡＴ5000ＣＦＴ一10000灵敏度相当，是、的倍，是的倍，是种具有高特异性和高敏感性的免Ｍ一ｉＥＬＩＳＡ疫学检测技术。虽然在布鲁氏菌病诊断