改进试管凝集试验法检测布鲁氏菌病抗体.pdf

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1、中国兽药杂志2012，46(2)：2～4／李翠，等改进试管凝集试验法检测布鲁氏菌病抗体李翠，关孚时，戴志红，蒋卉，温芳，陆连寿，王在时(中国兽医药品监察所，北京100081)[收稿日期]2011—07—18[文献标识码]A[文章编号]1002—1280{2012)02—0002-03[~01t1分类号]$854．43[摘要]为证实改进的试管凝集试验(SAT)的使用价值，分别用微量试管凝集试验(MSAT)和SAT以国际标准血清为参比检测6份牛布鲁氏菌病阳性血清的抗体效价。结果表明：MSAT和SAT试验结果一致，而且MSAT具有稀释方法更简便、精确，

2、省时省力，可节约血清、抗原等试验原材料，试验结果容易判定，重现性良好等优越性。[关键词]布鲁氏菌病；试管凝集试验；微量试管凝集试验DetectionofAnti——BrucellaabortusSeraAgglutinationTiterswithModifiedTubeAgglutinationTestLICui，GUANFu—shi，DAIZhi—hong，JIANGHui，WENFang，LULian—shou，WANGZai—shi(ChinaInstituteofVeterinaryDrugControl，Beijing100081，C

3、hina)Abstract：Inordertoprovetheusevalueofthemodifiedtubeagglutinationtest，sixanti—BrucellaabortusseraweredetectedwithMSATandSATreferredtotheinternationalstandard．TheresultsshowedthattheseratiterswerealmostconsistentdetectedwithSATandMSATandtheadvantagesofMSATcouldbelistasfoll

4、ows：Thedilutionmethodwassimplerandmoreaccurate．Wecouldsavetimeandefoa，andsavethematerialssuchasserum．antigenete．Theresultwaseasiertodetermineandwithgoodreproducibility．Keywords：Brucellaabortus；SAT；MSAT布鲁氏菌病通常由布鲁氏菌(前称流产布鲁更新，近年来认为SAT试验可以改进为微量法氏菌)引起，其感染呈全球趋势，给世界上很多国(MSAT)在96孔微量版

5、上操作，而且比传统的试家和地区带来了严重经济损失¨I2J。目前，血清学管凝集试验具有许多优点。为进一步证实其使用价检查是布鲁氏菌病诊断的常用方法j，其中试管值，我们分别用MSAT和SAT以国际标准血清为参凝集试验(SAT)自Wright建立以来一直是各国诊比检测6份牛布鲁氏菌病阳性血清的抗体。断布鲁氏菌病的常规血清学诊断方法，在布鲁氏菌1材料病的检测和控制规划中发挥了巨大的作用。牛布鲁氏菌病阳性血清国际标准品：从英国卫SAT试验操作简便，判定容易，有广阔的应用前桥VLA—OIE布鲁氏菌病参考实验室获得，批号为景，我国将其列为动物布鲁氏菌病诊断的国

6、家标准。N／A，1000IU／mL；牛布鲁氏菌病阳性血清：6份田然而，《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB／T18646—问采集的牛布鲁氏菌病阳性血清；牛布鲁氏菌病试2002)规定的方法是早些年根据当时的实验室仪器管凝集试验用抗原：由中国兽医药品监察所制备，设备条件建立的，随着实验仪器设备的不断发展与产品编号为200801，工作浓度为1：20；牛阴性血基金项目：“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD06A10)作者简介：李翠，硕士，助理研究员，从事兽用生物制品标准物质的研制工作。通讯作者：王在时。E—mail：wangzaishi@ivdc．go

7、v．(3112012，46(2)：2-4／李翠，等中国兽药杂志清：购自民海生物有限公司；稀释液：0．5％石炭酸程》(2000年版)按表1比例进行初稀释，然后生理盐水。将各血清初稀释液和标准血清用稀释液进行微量移液器：Effendorf；96孔U型底微量反应1：100倍稀释后，再分别稀释至终浓度1：300、板：购自GREINER公司。1：400、1：500、1：600、1：700。实验时在各小试管2方法中按浓度依次加入最终血清稀释液各0．5mL，再2．1SAT分别加入1：20稀释的牛布鲁氏菌病试管凝集试2．1．1试验方法_8将6份阳性血清分别用牛验

8、用抗原0．5mL。混合均匀后37℃温箱放置阴性血清依据《中华人民共和国兽用生物制品规22—24h，然后观察反应。表16份阳性血清初稀释液