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《SNT1090-2002-布氏杆菌病试管凝集试验操作规程.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1090一2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程Procedureoftubeagglutinationtestforbrucellosis2002一03门5发布2002一09一01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总肩SN/T1090-2002前言本标准是按照GB/T1.1-1993《标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分:标准编写的基本规定》和OIE《动物疾病诊断方法和疫苗使用标准手册》而制定的。本标准参考了原中华人民共和国动植物检疫局编写的《中
2、华人民共和国进出境动物检疫规程手册》，并结合了起草单位多年的检验检疫经验。本标准的附录A是标准的附录。本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人:王玉玲、朱世强。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。中华人民共和国出入境检验检疫行业标准sN/T1090-2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程Procedureoftubeagglutinationtestforbrucellosis范围本标准规定了布氏杆菌病试管凝集试验的操作技术要求
3、。本标准适用于羊种、牛种和猪种布氏杆菌感染家畜的检疫。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法试荆和材料3.1试剂3.1.，试验用蒸馏水为GB/T6682中的三级水。3.1.2稀释液;0.5%石炭酸生理盐水(含。.5%石炭酸,0.85/氯化钠溶液)。检验羊血清时用含。.5%石炭酸的10%盐溶液(含0.5%石炭酸,10%氯化钠溶液)
4、。3.1.3标准抗原:按照说明书使用。使用时充分摇匀，用稀释液作1，20(工作浓度)稀释。3.1.4标准阳性血清冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。3.1.5标准阴性血清:冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。3.2材料3.2.1试管架。3.2.2玻璃试管:规格为13mmX100mm,圆底，洁净。3.2.3微量移液器。3-2-4可调连续加样器。3.3被检血清3.3.1按常规方法采血分离血清。血清必须新鲜，无明显蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。3.3.2运送和保存血清样品防止血清冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内
5、不能送到实验室，可用冷藏方法运送血清。操作方法4.，确定被检血清的稀释度牛、马、骆驼稀释用1:50,1，100,1，200,1，400(4个稀释度);猪、山羊、绵羊和狗用1;25,1:50,1:100,1:200(4个稀释度)。_——-中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2002-03-15批准2002-09-01实施ISN/T1090-2002大规模检疫时也可用2个稀释度，即牛、马、骆驼用1，50,1，100，猪、山羊、绵羊和狗用1，25,1:50,为测定强阳性血清效价，稀释度可以增加。4.2稀释被检血清4.2
6、.1猪、山羊、绵羊和狗血清的稀释4.2.1.1每份被检血清用4支试管，标记检验编号后第I管加1.15mL稀释液，第2-4管各加人0.5mL稀释液。4.2-1.2取被检血清。1mL，加人第1管，充分混匀后吸弃0.25mL,4.2.1.3从第1管中吸取。.5mL加人到第2管，混合均匀后，再从第2管吸取。.5mL至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去。.5mL，稀释完毕。4.2.1.4从第1至第4管的血清稀释度分别为1，12.5,1，25,1，50,1，100,4.2.2牛、马和骆驼血清的稀释牛、马和骆驼血清的稀释
7、方法与3.2.1基本一致，差异是第1管加1.2mL稀释液和50pL被检血清。4.3加抗原将0.5mL抗原(1:20)加入已稀释好的各血清管中，并振摇均匀，猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1:25,1:50,1:100,1，200，牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1，50,1，100,1'"200,1:400。各反应管反应总量为1mLo4.4设立对照每次试验都应设立下列对照。4.4.1阴性血清对照阴性血清的稀释和加抗原的方法与被检血清同。4.4.2阳性血清对照阳性血清的最高稀释度应超过其效价滴度，加抗原的方法与被检血
8、清同。4.4.3抗原对照在0.5mL稀释液中，加0.5mL抗原(1，20>,4.5配制比浊管每次试验均须配制比浊管，作为判定凝集反应程度的依据，先将抗原(1:20)用等量稀释液作一倍稀释，然后按表1配制比浊管。表1比浊管的配制试管号12345抗原稀释液1，401.000.750.50;.0，250。.5%石炭酸生理盐水00.250.500.751.00清亮度
