布氏杆菌试管凝集.ppt

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1、布氏杆菌试管凝集实验1.实验流程表2.加石炭酸生理盐水t13.加待检血清t2-64.加抗原t75.结果6.结果判定t87.注意事项实验流程表管号1234567最终血清稀释度1:251:501:1001:200对照抗原对照阳性血清阴性血清1:251:250.5%石炭酸2.30.50.50.50.5－－生理盐水(ml)被检血清(ml)0.20.50.50.5－0.50.5标准抗原(1:20)0.50.50.50.50.50.50.5(ml)1.5ml0.5ml加石炭酸生理盐水每份血清用试管4支，另取对照试管3支，放置到试管架上。0.5%石炭酸生理盐水No.1加2.3ml、No.2.3.4.5.加0

2、.5ml、No.6.7不加0.5ml2.3ml0.5ml0.5ml0.5ml加待检血清再向No.1加待检血清0.2ml，充分混匀，吸取1.5ml弃去，再吸取0.5ml加入No.2管，混匀后吸取0.5ml加入No.3管，直加到No.4。No.5管不加待检血清，No.6管加，No.7管加1：25的布氏杆菌阴性血清0.5ml0.2ml2.3ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml2.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml1.5ml1.5ml2.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml1.0ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml

3、0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml加抗原各加以0.5%石炭酸生理盐水稀释20倍的布氏杆菌试管凝集抗原0.5ml0.5ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml结果在各试管加完抗原后，将7支试管同时充分混匀，置37℃恒温箱中培养4—10h,并观察记录结果结果判定++++液体完全透明，菌体完全被凝集呈伞状沉于管底，振荡时沉淀物呈片状、块状或颗粒状（即100％凝集）+++液体稍混浊，菌体大部分被凝集于管底，振荡时沉淀物呈片状、块状或颗粒状（即75％凝集）++液体不甚透明，管底有明显的凝集沉淀，振荡时有块状或小片絮状物（即5

4、0％凝集）+液体透明不明显或不透明，有不甚明显的沉淀或仅有沉淀的痕迹（即25％凝集）－液体不透明，管底无凝集或有一部分沉淀，但振荡时立即均匀散开+++++++++－1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml注意事项1待检血清稀释度：牛马1:50、1:100、1:200、1:400；猪羊狗1:25、1:50、1:100、1:2002确定血清凝集价（滴度）时，应以出现++以上凝集现象的最高稀释度为准3牛马的凝集价1：100以上，猪,绵羊,山羊,狗1：50以上为阳性；牛马的凝集价1：50以上，猪,绵羊,山羊,狗1：25为可疑