生物试题练习题教案学案课件例谈微生物的培养与分离实验.doc

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1、例谈微生物的培养与分离实验中学生物学实验的基本技能主要是显微镜的操作、临时装片的制作和微生物培养的基本技术等，其中显微镜的操作、临时装片的制作是初中生物学教学的要求，而微生物培养的基本技术则是高中生物学教学的基本任务。高三生物（选修）教材共四个学生实验，其中两个是关于微生物培养的基本技术和微生物的分离提纯，可见微生物培养的基本技术在高中教学中的地位，在高考命题以能力立意、重视实验考查的今天，使学生掌握微生物培养的基本技术，更有特别的意义。为此，笔者在实验教学实践中结合选修教材实验二、实验三和高校微生物学教程,编写两道微生物实验习题，旨在使学生掌握微生物培养的基本

2、技术，学会微生物分离的一般方法，并对两例作简要分析，供大家参考。例一：下面两段材料介绍了两种筛选微生物的方法：方法一：19世纪后期，Robertkoch创造了用琼脂制作固体培养基，成功地将混杂地生活在一起的微生物进行了分离和提纯。他先将微生物样品稀释，用接种针沾少许稀释菌液在固体培养基上划线接种，恒温培养后从培养基表面挑选相同特征的某一种菌落，经过几次相同的培养过程，便可将其分离、提纯。请你模仿方法一，将表层土壤中的圆褐固氮菌与其它杂菌分离，并提纯出其中某一种圆褐固氮菌。你选择的实验材料和用具有：已消毒的培养皿若干.接种针一支、酒精灯.无菌水、表层土壤样品，还有

3、®你实验的操作步骤是：（一）分离圆褐固氮菌：（1）样品的稀释：②(2)③（二）提纯某一种圆褐固氮菌:（1）样品的稀释：④（2）®方法二：20世纪中期，J.lederberg夫妇创造了影印平板培养法用于筛选具有抗性的微生物。他们用灭菌后的丝绒布包裹在小的木质圆柱体外（外形似印章），让末端均匀沾满待筛选的菌种，然后将“印章”先后影印在普通培养基和选择培养基上，影印时保持印章的相对位置严格的对应性。经恒温培养后，通过对照培养基上生长的菌落，就可获得某种抗性的微生物.请你模仿方法二，用含四环素的选择培养基将不具抗四环素抗性的大肠杆菌筛选出来.你选择的实验材料和用具有：已

4、灭菌的“印章”、已消毒的培养皿若干、标签纸、含四环素的选择培养基、大肠杆菌母液，还有⑥;你实验的操作步骤是：（一）用“印章”形印接种后培养：—①;（二）⑧°［能力要求］培养学生创造能力是素质教育首要任务，而模仿是创造的开端。此题旨在考查学生阅读分析、理解处理材料的能力；同时在对前人科研模仿的基础上，应用试题给予的知识解决新问题的创造能力。［解题指导］在第1小题中，要分析Robertkoch分离和提纯某种微生物的方法:他先将微生物.样虽稀餐,用接种针沾少许稀释菌液在固体培养基上划鏡按猊,恒温培养后从培养基表面挑选相同特征的某一种菌落，经过几次相同的培养过•••••

5、••••••••••••程，便可将其分离、提纯。然后根据圆褐固氮菌能自生固氮的特点，配制无氮培养基，先将其与其它不能固氮的微生物分离；再从中挑选相同特征的某一种菌落进行培养，以达到提纯某一种圆褐固氮菌的目的。在第2小题中，要理解J.lederberg夫妇创造了影印平板培养法是一种.回.搖箍选县直茶賛延的微生物的方法。他们用“印章”先卮影宜在普通培养基和选择培养基上，影印时保持印章的相对位置芒•格•对应几通过对照两种培养基上生长的菌落，就可获得实验需要的微生物。然后根据不具有抗性的大肠杆菌在普通培养基能够生长，而在选择培养基不能生长的特点，便能筛选出不具有抗性的大

6、肠杆菌。试题的难点是间接筛选，而不是直接选择出具有抗性的大肠杆菌。［参考答案］①灭菌后的无氮固体培养基②将表层土壤样品加无菌水稀释，备用③接种后恒温培养：将接种针在酒精灯的外焰上灼烧，冷却后沾少许表层土壤样品稀释液，在火焰旁于灭菌后的无氮固体培养基上划线接种，置于25°C恒温箱中培养一周。在培养基表面生长的菌落便是能自生固氮的圆褐固氮菌④用接种针从生长的菌落中挑选相同特征作为再次提纯的样品，加无菌水稀释备用⑤接种后恒温培养：方法同③，经几次相同的培养过程，便可将其分离、提纯得到某一种圆褐固氮菌。⑥普通固体培养基⑦用“印章”沾大肠杆菌母液先后影印在普通培养基和选择

7、培养基上，影印时保持印章的相对位置严格对应，影印后置于25°C恒温箱中培养一周⑧筛选后取样接种：用接种针挑选在普通培养基上能够生长而在选择培养基对应位置上不能生长的菌落，配成母液再按上述方法影印接种，便可得到不具抗性的大肠杆菌。例二：为了研究细菌对青霉素抗药性形成的机理，有人设计了如下实验方案：（一）取培养皿A若干（人、A?、As・・・・・•）,加入普通培养基；取培养皿B若干（B“B2.B3••…）,加入含青霉素的培养基；（二）将适量细菌培养液涂抹在培养皿A】的培养基表面，放在适宜的温度下培养一段时间，培养基的表面长出些细菌菌落；（三）用灭菌后的丝绒包上棉花制成

8、的一枚“印章”，在A】上