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《高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及标准化研究进筥鄢盛恺.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华医学检验杂志1998年1月第21卷第1期·19·õ血清胆固醇检测标准化专栏õ高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及标准化研究进展鄢盛恺林其燧众多流行病学研究证实,高密度脂蛋白胆固醇测定HDL-C的参考方法为超速离心法,也为NCEP[4](HDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)呈负相关。美国所推荐。该法分三步进行:(1)超速离心(40000r/Framingham的研究显示,HDL-C每减少0.026min,18.5小时)除去密度(d)<1.006kg/L富含mmol/L(1mg/dl),冠心病(CHD)发生的风险将增TG的脂蛋白(CM、VLDL)。(2)下层
2、悬浮液用肝素-2+加2%～3%。目前临床上已广泛采用HDL-C下降MnCl2法(Hep-Mn法)离心沉淀(1500×g,30分作为CHD危险因素指标。低HDL-C[<0.91钟),以除去富含apoB的脂蛋白[LDL、Lp(a)]。(3)mmol/L(35mg/dl)]是CHD的主要危险因素,而测定上清液中chol含量,方法用CDC参考方法高HDL-C[≥1.55mmol/L(60mg/dl)]被认为是(ALBK法)。此法主要用于靶值的确定及各种[1,2]负危险因子,具有保护性。作者参考美国国家胆HDL-C检测方法学评价,也是国际间人群调查研究固醇教育计划
3、(NCEP)有关文件及新近文献资料,准确性基础。由于需超速离心机,操作复杂且严格,对HDL-C检测方法及标准化问题作一简述。所需标本量大(5ml血浆),离心时间长,一般实验一、HDL的生物化学室难以开展,不适于大规模标本比较研究。CDC胆与乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和固醇参考方法实验室网络(CholesterolReference低密度脂蛋白(LDL)相比,高密度脂蛋白(HDL)是MethodLaboratoryNetwork,CRMLN)近来选用密度最大的脂蛋白(d=1.063～1.210kg/L)。其组了一种“指定性比较方法”作为转
4、移CDC参考方法分中蛋白质(Pro)、磷脂(PL)、胆固醇(chol)和甘油准确性的适用方法。此法首先用硫酸葡聚糖(DS50,三酯(TG)各约占50%、25%、20%和5%。HDL中2+分子量5万)作沉淀剂(DS50-Mg),离心沉淀,除去Pro主要是载脂蛋白(apo)AI和AII;chol占总胆固含apoB的脂蛋白[CM、VLDL、IDL、LDL和Lp醇(TC)的25%～35%,酯化胆固醇(CE)和游离胆(a)];然后上清液HDL中胆固醇采用ALBK法测固醇(FC)之比约为3÷1。HDL可通过酶和受体的作定。这种方法已在网络的每个实验室被仔细评价及用,
5、将周围组织的chol移至肝脏降解处理,同时抑成功地进行标准化,相对CDC参考方法而言,已大制细胞结合和摄取LDL-C,阻止chol在动脉壁的沉为简化[5]。发展与CDC参考方法结果具有可比性的[3]积,故HDL被认为是AS的预防因子。改良简单化参考方法将会促进HDL-C标准化在常二、HDL-C检测方法规实验室中的开展。由于所有脂蛋白都含有chol,因此必须从其他2.化学沉淀法:常用的沉淀剂为多阴离子,如磷脂蛋白中分离出HDL后再行测定。分离HDL的方钨酸(PTA)、DS、肝素(Hep)或非离子多聚体如聚法有超速离心法、凝胶过滤法、免疫化学法、电泳法乙二醇
6、(PEG)与某些两价阳离子(如Mg2+、Ca2+、及化学沉淀法。临床化学实验室应用最广泛的是化2+Mn)合用能使除HDL外含apoB的脂蛋白都沉学沉淀法。近来国外连续报道了几种HDL-C的直淀。沉淀形成的机制还不十分清楚。HDL中chol多接测定方法,因其简便、快速,能进行自动化分析,已用酶法(CHOD-PAP)测定。此类方法操作简单,不引起广泛关注。需昂贵设备且费用较低,适用于普通实验室。被1.参考方法:美国疾病控制与预防中心(CDC)[5]NCEP推荐为常规方法。2+作者单位:100730中国医学科学院中国协和医科大学北京早期的沉淀法如用Hep-Mn
7、法,易受高TG2+协和医院检验科干扰,使沉淀后的上清呈浑浊状,且Mn干扰酶法·20·ChinJMedLabSci,January1998,Vol21,No.1测定chol,故目前已基本不用。只是CDC-NHLBI等,目前多用于临床研究。(国立心肺血液学研究所)现存的有关HDL-C与4.直接测定法:由于化学沉淀法测定HDL-CCHD风险的流行病与临床数据库源于此法,故需将标本进行选择性沉淀预处理后,上清液方可用2+NCEP建议予以保留。PEG6000-Mg法沉淀效率酶法或化学法测定chol。其最大缺点是不能进行自高,与CDC参考方法有较好一致性,但精密度较
8、差,动化分析,尤其不适应大规模流行病学调查或临床[6]美国现已很少采用。Warn
